[基础医学]上海交通大学医学院-流式细胞仪.pdf

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[基础医学]上海交通大学医学院-流式细胞仪

流式细胞仪 上海交通大学医学院 丁磊 副教授 1of69 流式细胞术(FCM)定义: 流式细胞术(FCM)定义: FCM是以流式细胞仪为检测手段的一项 能快速、精确的对单个细胞理化特性进行 多参数定量分析和分选的技术。 Laser FALS Sensor 2 of69 特点: 特点: 单细胞的流动的 活细胞的 定量的 多参数的 高统计学精度的 分选细胞 3 of69 一、 流式细胞仪的分析及分选原理 二、 数据的显示与分析 三、 流式细胞仪分析的技术要求 四、 流式细胞术应用 4 of69 流式细胞仪的分析及分选原理 一 工作原理: FCM是一种在计算机技术支持下的高度 自动化的细胞显微荧光脉冲分光光度仪。 5 of69 (一) 基本组成结构 1、液流系统 样品流和鞘流 2、光学系统 激光、透镜组、 光电倍增管等。 3、数据处理系统 6 of69 1、液流系统 样品流和鞘流 Injector Tip Sheath fluid 荧光信号 荧光信号 激光束 激光束 7 of69 流动室 Flow Cell 孔径50-200μm 检测区离喷口200μm 有分选功能 Laser 8 of69 9 of69 液流驱动系统 (示意图) 流速与压力的关系服从Bernoulli方程,即 P=(1/2)ρV2 (忽略高度的变化)。改变气压,就可获得不同的流速。 10of69 2、光学系统 PMT 激光、透镜组、光电倍增管等。 4 PMT Dichroic 3 Flow cell Filters

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