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[基础医学]上海交通大学医学院-流式细胞仪
流式细胞仪
上海交通大学医学院
丁磊 副教授
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流式细胞术(FCM)定义:
流式细胞术(FCM)定义:
FCM是以流式细胞仪为检测手段的一项
能快速、精确的对单个细胞理化特性进行
多参数定量分析和分选的技术。
Laser
FALS Sensor
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特点:
特点:
单细胞的流动的
活细胞的
定量的
多参数的
高统计学精度的
分选细胞
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一、 流式细胞仪的分析及分选原理
二、 数据的显示与分析
三、 流式细胞仪分析的技术要求
四、 流式细胞术应用
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流式细胞仪的分析及分选原理
一 工作原理:
FCM是一种在计算机技术支持下的高度
自动化的细胞显微荧光脉冲分光光度仪。
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(一) 基本组成结构
1、液流系统 样品流和鞘流
2、光学系统 激光、透镜组、
光电倍增管等。
3、数据处理系统
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1、液流系统
样品流和鞘流
Injector
Tip Sheath
fluid
荧光信号
荧光信号
激光束
激光束
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流动室 Flow Cell
孔径50-200μm
检测区离喷口200μm
有分选功能 Laser
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液流驱动系统 (示意图)
流速与压力的关系服从Bernoulli方程,即 P=(1/2)ρV2
(忽略高度的变化)。改变气压,就可获得不同的流速。
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2、光学系统
PMT
激光、透镜组、光电倍增管等。 4
PMT
Dichroic 3
Flow cell Filters
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