[工学]23 微生物遗传学5.ppt

两亲本菌株的选择和遗传标记的制作（选择不同的营养缺陷型， （A: [a+b-], B:[a-b+]） 对药物抗性差异） 原生质体的制备（高渗条件） 原生质体再生（测定再生率） 融合（PEG、离心沉淀、电脉冲等） 融合子的检出（直接检出法和间接检出法） 实用性菌株的筛选 2.微生物与人类基因组计划 微生物基因组测序工作是在人类基因组计划的促进下开始的，最开始是作为模式生物，后来不断发展，已成为研究微生物学的最有力的手段。 被选择进行全基因组测序的微生物： （1）人类基因组计划中的模式生物重要性 被选择进行全基因组测序的微生物： （2）与人类生活关系密切的微生物 4. 基因组测序方法 全基因组鸟枪测序步骤： 用超声波将基因组随机打断成相当小的片段，这些片段与质粒载体结合，产生质粒克隆文库。 制备克隆和提纯DNA，然后进行测序。 用专门的计算机程序将已测序的DNA片段通过片段之间核苷酸序列重叠的比较，可装配成比较长的DNA序列。 重叠的大片段按合适的顺序排队，得到完整的DNA序列。 5. 基因组序列的注释和意义 基因组序列注释的目标是确定特定基因在基因组图谱中位置。此外，还能提供一些关于转座因子、操纵子、重复序列及其他基因组特征的某些信息。 流感嗜血菌的基因组测序结果和注释见下图。 外同心圈用不同的颜色代表不同功能的编码区(例如，氨基酸的生物合成、能量代谢、复制、转录、翻译及调节功能等)； 外圈周边显示的Nat I、Rsr II、Sam I等限制性酶切位点； 从外数的第二圈显示高G+C含量和高A+T含量的区域； 第三圈显示由?噬菌体克隆所包含的片段； 第四圈显示rRNA操纵子、tRNA和类似Mu原噬菌体； 第五圈显示简单的串联重复序列和可能的复制起点和潜在的终止序列。 第七节 真核微生物的基因重组 真核生物的基因重组方式主要有以下四种： （1）有性杂交 （2）准性杂交 （3）原生质体融合 （4）转化 一 、有性杂交（sexual hybridization） 1. 定义：不同遗传型两性细胞间发生的接合和 随之进行的染色体重组，进而产生新 遗传型后代的一种育种技术。 凡能产有性孢子的酵母菌、霉菌和蕈（Xun）菌，原则上都能应用与高等动、植物杂交育种相似的有性杂交方法进行育种。 3. 酿酒酵母的有性杂交育种程序： 两亲本菌株的选择 单倍体细胞的分离与验证 单倍体细胞遗传标记的制作 杂交 杂合子的检出 优良性状个体的筛选与性能测试 二、准性杂交/生殖（parasexual hybridization /reproduction） 1. 定义：同种生物两个不同菌株的体细胞（即带有不同遗传 性状的两个单倍体细胞或菌丝）经融合后，不经减数 分裂而导致低频率基因重组并产生重组子的生殖 方式。 准性生殖是丝状真菌，特别是不产生有性孢子的丝状真菌（半知菌亚门的真菌）特有的遗传现象。 2. 过程： 1）菌丝联结； 2）异核体的形成； （同时具有一个以上不同遗传型细胞核的细胞） 3）核融合和杂合二倍体的形成； （细胞核中含有2个不同来源染色体组的菌体细胞。发生机会为百万分之一。） 4）单倍体化 （杂合二倍体极不稳定，在其有丝分裂过程中，有极少数细胞，其同