[理化生]选修12.ppt

2、将目的基因导入动物细胞 ①方法：显微注射法 ②程序： 归纳: 基因工程的基本操作程序 获取目的基因 从基因文库 利用PCR扩增目的基因 化学方法人工合成 构建基因表达载体 复制原点、目的基因、启动子、终止子、标记基因 将目的基因导入受体细胞 农杆菌转化法、显微注射法 目的基因的检测与鉴定 检测：是否插入、转录、翻译 鉴定： （2011 海南高考）回答有关基因工程的问题： （1）构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生粘性末端，也可能产生 末端。若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择能使二者产生 黏性末端的限制酶。 （2）利用大肠杆菌产生人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等，其中启动子的作用是 。 在用表达载体转化大肠杆菌时，常用 处理大肠杆菌，以利于表达载体进入；为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用标记的胰岛素基因片段作探针与mRNA杂交，该杂交技术称为 。 为了检测胰岛素基因转录的mRNA是否翻译成蛋白质，常用 杂交技术。 （3）如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的 中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的 上。 （二）、鉴定（个体生物学水平） 2、检测目的基因是否转录出了mRNA 3、检测目的基因是否翻译成蛋白质 抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等 DNA-RNA分子杂交 方法: 抗原-抗体杂交 用上述探针和转基因生物的mRNA杂交,若出现杂交带,表明目的基因转录出了mRNA （1）方法: （2）过程: 归纳步骤 检测— 鉴定—— ①检测转基因生物染色体的DNA 上是否插入了目的基因 ②检测目的基因是否转录出了mRNA ③检测目的基因是否翻译成蛋白质 抗虫鉴定、抗病鉴定等 方法—— 方法—— 方法—— DNA分子杂交 分子杂交 抗原-抗体杂交 平 相同 RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录出mRNA。 Ca2+ 分子杂交技术 抗原-抗体 T-DNA 染色体DNA 潮师高级中学 范汉金 知识点一：1.原核细胞的基因结构 非编码区 非编码区 编码区 与RNA聚合酶结合位点 启动子 终止子 启动子：位于基因首端一段能与RNA聚合酶结合并能起始mRNA合成的序列。没有启动子，基因就不能转录。 终止子：位于基因的尾端的一段特殊的DNA片断，它能阻碍RNA聚合酶的移动，并使其从DNA模板链上脱离下来，使转录终止。 ：能转录相应的信使RNA，能编码蛋白质。 编码区 ：不能转录为信使RNA，不能编码蛋白质。有调控遗传信息表达的核苷酸序列 (启动子、终止子） 非编码区 编码区上游 编码区下游 编码区 非编码区 非编码区 与RNA聚酶 结合位点 内含子 外显子 能够编码蛋白质的序列叫做外显子 不能够编码蛋白质的序列叫做内含子 启动子 终止子 内含子： 外显子： 知识点一：2.真核细胞的基因结构 编码区上游 编码区下游 都由能够编码蛋白质的______和具有调控作用的______区组成的 相同点 编码区是间隔的、_____的 编码区是 _____的 不同点 真核细胞 原核细胞 原核细胞与真核细胞的基因结构比较 思考 编码相同数目氨基酸的蛋白质，原核细胞与真核细胞基因结构一样长吗？ 连续 不连续 编码区 非编码 1、目的基因的获取 2、基因表达载体的构建 3、将目的基因导入受体细胞 4、目的基因的检测与鉴定 知识点二.基因工程基本操作的四个步骤 1.2 基因工程的基本操作程序 一、目的基因的获取 (一)目的基因主要是______________________ 编码蛋白质的结构基因 （二）获取目的基因的常用方法有哪些? 1、从基因文库中获取 2、利用PCR技术扩增 3、人工合成 （一）从基因文库中直接获取 1.基因文库： 将含有某种生物不同基因的许多DNA片段,导入受体菌的群体中储存,各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因,称为基因文库。 一、目的基因的获取 2.基因文库的分类: 种类 基因组文库：含有一种生物的全部基因 部分基因文库：只包含了一种生物