[PPT模板]细胞培养基的选择.pdf

细胞培养基本技术2 第一部分：细胞培养用液及培养基 第一部分：细胞培养用液及培养基 ☆培养用液——水 平衡盐溶液 消化液 ☆培养基——天然培养基 合成培养基 第二部分内容： 原代细胞分离、培养（酶消化法和组织块培养法）。 细胞生长状况的观察。 培养细胞一代生长过程。 传代。 冻存与复苏。 细胞培养注意事项（如细胞污染）。 细胞培养的一些专业术语介绍（如细胞株、系， 上皮细胞型、成纤维细胞型） 第一部分： 动物细胞用液的制备 细胞培养基本技术 细胞培养用液及培养基 细胞培养用液及培养基 ☆培养用液——水 平衡盐溶液 消化液 ☆培养基——天然培养基 合成培养基 配液前准备： 配液前准备： ①滤器、滤膜、磁力搅拌器、天平、烧 杯、量筒、注射器。 贮液瓶（生理盐水瓶）、瓶塞、15磅， 15磅， 121℃，20分钟蒸气灭菌 121℃，20分钟蒸气灭菌 ②NaHCO3、NaOH、HCl、胎牛（小牛） 血清、青霉素、链霉素、三蒸水、培养 基粉剂 配液过滤无菌操作要求： 配液过滤无菌操作要求： 操作前无菌室及无菌操作台以紫外灯照射30 操作前无菌室及无菌操作台以紫外灯照射30 分钟灭菌，以70 % ethanol 擦拭无菌操作抬 分钟灭菌，以70 % ethanol 擦拭无菌操作抬 面，并开启无菌操作台风扇运转10 分钟 面，并开启无菌操作台风扇运转10 分钟 操作时，小心取用无菌之实验物品，避免造 操作时，小心取用无菌之实验物品，避免造 成污染。勿碰触吸管尖头部或容器瓶口。 成污染。勿碰触吸管尖头部或容器瓶口。 在整个无菌操作过程中都应该在酒精灯的周 在整个无菌操作过程中都应该在酒精灯的周 围进行 围进行 一、细胞培养用液及培养液——水 ● （一）水——营养物、代谢物溶于水中 调节渗透压、平衡pH值 普通自来水含大量杂质，不利于细胞生长 高度纯化水—— 离子交换水： 蒸馏水： 三蒸、新鲜 超纯净水： 离子交换水： 离子交换水中仍有一些非离子物质及有 机物，一般在细胞培养中较少使用。 双蒸水、三蒸水： 细胞培养用水必须非常纯净，不含有离 子和其他的杂质。 需要用新鲜的双蒸水、三蒸水 超纯净水： 采用进口的RO膜、离子交换膜、离子交换树 脂、抛光核子级树脂、静音高压泵、电磁阀 等，产品性能得到最大化的保证； 分子生物学、生命科学、基因研究、组织培 养、试管婴儿、生物工程、动物细胞培养、培 养基制备、DNA测序、氨基酸分析、疾控中 心、水质检测中心、药检所、质检所、高校科 研等标准实验室及各种高端精密仪器用水。 （二）、平衡盐液体 （Balanced salt （二）、平衡盐液体 solution, BSS ） ： ： 组织细胞培养中常用的基本液体，可以维持渗透 组织细胞培养中常用的基本液体，可以维持渗透 压、调节pH值、供给细胞生存所需的能量和无机 压、调节pH值、供给细胞生存所需的能量和