激光扫描共聚焦显微镜LaserScanningConfocolMicroscopyLSCM.PDF

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激光扫描共聚焦显微镜LaserScanningConfocolMicroscopyLSCM

目的结构是用荧光探针标记的, 激光扫描共聚焦显微镜 形态学研究:组织细 都可以用激光共聚焦显微镜观察 胞标本的抗原免疫荧 (Laser Scanning Confocol 光检测,凋亡检测… Microscopy, LSCM) 分子生物学:荧光原位杂交对DNA 活细胞动态荧光测量:细胞 和RNA定量,外源基因在真核细胞 内Ca2+、Cl 等离子的动态分 的表达及定位,蛋白质相互作用 科学实验中心三部 张四洋 布及定量,细胞连接间的信 (FRET)… 息传递(FRAP)…  成像基础:荧光 成像主要原理:pinhole (针孔)  照明针孔:光源后,点照明  检测针孔:检测器前,点探测 1 z sections = images y z x 2 激光共聚焦显微镜的设计特点:  Laser :经过照明针孔后形成点光源,光源方向 性强、发散小、亮度高、颜色纯、单色性强  Beamsplitter (光束分离器) :将样品激发荧光与 其他非信号光线分开  Pinhole (照明针孔和探测针孔) :最大限度的阻 挡非聚焦平面以及聚焦平面上非焦点斑以外的 散射光,以保证探测器针孔所接受到的荧光信 号全部来自于样品焦点位置  PMT (PhotoMultiplier Tube, 光电倍增管) :检测

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