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[2018年必威体育精装版整理]3-实验室基本知识
精 密 度 精密度(precision)是指同一标本,在一定条件下多次重复测定所得到的一系列单次测定值之间的符合程度。它表示测定结果中随机误差大小程度的指标。 精密度的大小可用标准差(S)或变异系数(CV%)来表示。当用S和CV%表示精密度时,通常应指出实验重复的次数(n)及其平均值( ) 连续测定精密度是指在相同条件下,对同一标本连续进行 n 次重复测定结果的符合程度。 重复性精密度又称室(批)内精密度是指相同的条件下(同样方法、同种试剂和标准品、同样的仪器、同一实验室由同一人操作,并要保持实验期间准确性不变)对同一标本,在尽可能短的时间内进行m轮n次重复测定结果之间相互接近的程度。 用变异系数表示时则 ⒈表示连续测定精密度 ⒉表示重复性精密度 准 确 度 准确度(accuracy)是指测定结果与真值接近的程度。准确度主要受系统误差支配。 准确度一般用偏差和偏差系数来表示。 偏差为重复测定的均值( )与真值之差。 特异度和干扰 特异度(specificity)即特异性或专一性,是指在特定实验条件下分析试剂只对待测物起反应,而对其它结构相似的非被测物质不发生反应。 分析方法的特异度越高,则测定结果越准确。 干扰(interference)是指标本中某些非被测物质本身不与分析试剂反应,但以其它形式使待测物测定值偏高或偏低,这些非被测物质称为干扰物,这种现象称为干扰。 例如:用邻甲苯胺法测定葡萄糖时,标本中的甘露糖、半乳糖等也能与邻甲苯胺反应,并产生与葡萄糖反应相似的吸收光谱,引起正偏差,这就是特异度欠佳的表现。 GOD-POD法测定血糖时,尿酸可和GOD催化葡萄糖产生的H2O2反应,使部分H2O2不能参加POD的第二步反应,造成显色程度下降,引起负偏差。此过程尿酸本身并未与试剂直接反应,但对GOD-POD法测定血糖有干扰。 检测能力 检测能力,即检测限度或检出限(detection limit)是指能与适当的“空白”读数相区别的待测物的最小值。 空白读数是指由基质、试剂所得的读数。 常用“空白读数+3S”表示检出限 评价实验 评价实验包括: ①重复性实验 ②回收实验 ③干扰实验 ④分析比较实验 重复性实验 所谓重复性试验就是将同一材料分成数份试验标本进行多次分析测定,并计算其均数( )、标准差(S)、和变异系数(CV)。目的是检测侯选方法的随机误差 。 重复性试验按其进行的形式不同分为: ①批内重复性试验 ②日内重复性试验 ③日间重复性试验 ④病人标本的平行双份测定 批内重复性试验 用同一份标本在短时间内用侯选的方法作多次(一般20次)重复测定。 一般要求CV应小于5%,精密的分析或多次平行测定要求CV小于2%。 日内重复性试验 在一天内对同一个或数个标本作数批重复测定,观察变异结果。 因在一天内重复测定数批,所受影响因素比批内多,所得CV值可能比批内稍大些。 日间重复性试验 将同一标本分成数份,用侯选的方法每天测一次,连续测20天,观察变异结果。 日间重复性试验的CV可能比日内重复性的大,但它可反映工作的实际状况。 病人标本的平行双份测定 在不易得到含有合适基质的稳定标本的情况下,常选择一批病人标本(20 ~ 100份),其待测物浓度不超过方法的分析范围,作一批或数批测定,每标本均平行做两份,用双份测定结果之差(d)来计算S。 回收试验 将已知浓度的被测物标准液加入到常规标本中,然后用侯选的方法,测定标本加入前后的结果,观察其对加入物的回收能力,称为回收试验。通常用回收率表示。本试验的目的是检测侯选方法的比例系统误差。 回收试验的方法 将被测物标准液加入到病人标本中,成为分析标本;原病人标本中加入等量的无被测物的溶剂作为基础标本,然后用侯选的方法测定并计算各自的结果。 ①基础标本:血清2ml+蒸馏水0.1ml ②分析标本:血清2ml+30mmol/L葡萄糖 标准液0.1ml 回收试验的计算 ①回收浓度=分析标本测得浓度-基础标本测得浓度 ②加入浓度= 标准液量(ml) 血清量(ml)+标准液量(ml) ×标准液浓度 回收浓度 加入浓度 ×100 回收率(%)= ③ 回收试验的注意事项 ①准确吸量 ②加入标准物的量一般占标本总体积的
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