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[农学]实验六细菌大小的测量和放线菌的形态观察
实验六 细菌大小测量和放线菌形态观察 一 实验目的 1 观察放线菌的形态特征; 2 学习接目测微计的校正方法;? 3 学习使用显微镜测微尺测定微生物细胞大小 。 二 实验原理 放线菌一般由分枝状菌丝组成,它的菌丝可分为基内菌丝(营养菌丝)、气生菌丝或有孢子丝三种。放线菌生长到一定阶段,大部分气生菌丝分化成孢子丝,通过横割分列的方式产生成串的分生孢子。孢子丝形态多样,有直、波曲、钩状、螺旋状、轮生等多种形态。孢子也有球形、椭圆形、杆状和瓜子状等等。它们的形态构造都是放线菌分类鉴定的重要依据。 显微测微计由镜台测微计和目镜测微计两部分组成。后者可直接用于测量细胞大小。由于目镜测微计所测量的是微生物细胞经过显微镜放大之后所成像的大小,刻度实际代表的长度随使用的目镜和物镜放大倍数及镜筒的长度而改变,所以,使用前须先用镜台测微计进行标定,求出某一放大率下,目镜测微计每一小格所代表的长度,然后用目镜测微计直接测被测对象的大小。镜台测微计是一块中央有精确刻玻片,刻度的总长为lmm,等分为100小格,每小格长10um,专用于对目镜测微计进行标定的。 三 实验器材 放线菌涂片 显微镜 目镜测微尺 镜台测微尺 四 实验步骤 一)放线菌的形态观察 1.营养菌丝的观察 2.气生菌丝与营养菌丝的比较观察 3.孢子丝及孢子的观察 ?二)微生物菌体大小的测定 1 ?目镜测微尺的校正 把目镜的上透镜旋下,将目镜测微尺的刻度朝下轻轻地装入目镜的隔板上,把镜台测微尺置于载物台上,刻度朝上。先用低倍镜观察,对准焦距,视野中看清镜台测微尺的刻度后,转动目镜,使目镜测微尺与镜台测微尺的刻度平行,移动推动器,使两尺重叠,再使两尺的“0”刻度完全重合,定位后,仔细寻找两尺第二个完全重合的刻度,计数两重合刻度之间目镜测微尺的格数和镜台测微尺的格数。因为镜台测微尺的刻度每格长l0μm,所以由下列公式可以算出目镜测微尺每格所代表的长度。 ? 目镜测微尺每格长度=(镜台测微尺格数/目镜测微尺格数)xl0um 例如目镜测微尺5小格正好与镜台测微尺5小格重叠,已知镜台测微尺每小格为l0μm,则目镜测微尺上每小格长度为=5×10μm/5=10μm 用同法分别校正在高倍镜下和油镜下目镜测微尺每小格所代表的长度。 由于不同显微镜及附件的放大倍数不同,因此校正目镜测微尺必须针对特定的显微镜和附件(特定的物镜、目镜、镜筒长度)进行,而且只能在特定的情况下重复使用,当更换不同放大倍数的目镜或物镜时,必须重新校正目镜测微尺每一格所代表的长度。 2??菌体大小的测定 将标本先在低倍镜下找到目的物,然后在高倍镜下用目镜测微尺测定每个菌体长度和宽度所占的刻度,即可换算成菌体的长和宽。 求平均值 一般测量微生物细胞的大小,用同一放大倍数在同一标本上任意测定l0一20个菌体后,求出其平均值即可代表该菌的大小。 五 实验报告及作业1 绘图或填表 绘制在显微镜下观察到的放线菌的形态特征; 通过测量将实验结果填入下列表格 物镜 目尺格数 台尺格数 目尺校正值(μm) 10× 40× 100× ΔΔ菌大小测定记录(格) 二)霉菌的形态观察 * * * * * 1? 2? 3? 4? 5? 6? 7? 8? 9? 10? 11? 12? 13? 14? 15? 平均值 长 宽 结果计算? 长μm=平均格数×校正值 宽μm=平均格数×校正值 大小表示:宽μm×长μm 2 思考 P48 1、2 根据菌丝的分布和功能分 营养菌丝 气生菌丝 繁殖器官 霉菌的代表属 根霉(Rhizopus) ◆繁殖:孢囊孢子、厚垣孢子、接合孢子。 ◆形态特征:菌丝发达。具假根和匍匐菌丝。 ◆应用:糖化菌(淀粉酶)、饲料发酵、生产有机酸 根霉假根(Rhizopus sp.) Rhizopus sporangiophores rhizoids are opposite sporangiophores aseptate hyphae 曲霉(Aspergillus) ◆繁殖:分生孢子 ◆形态特征:菌丝有隔,具足细胞、分生孢子梗及膨大顶囊。 ◆应用:酿造酒、酱、有机酸、酶制剂。 *
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