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[农学]生态学实验方法
该属植物具有防风固沙、保持水土、发挥良好的环境效益,而且还有饲用、绿肥、薪炭、蜜源、人药、提供木质纤维等资源价值 .其种子不仅是很有价值的油脂资源,还是潜在的食用植物蛋白资源。 Contents 论文的核心问题及目的 开花动态、花朵数量性状特征、花粉及柱头的活力、繁育系统、访花者种类、访花频率等进行定位观测、显微观察和生理测定 旨在揭示柠条锦鸡儿开花过程与其访花动物之间的协同进化关系以及它们与生态环境之间的适应关系,这不仅对荒漠地区生物多样性的保护和资源的可持续利用具有意义,而且能为柠条锦鸡儿的引种栽培、合理开发利用提供理论依据或技术支持。 解决核心问题的途径 开花动态及花朵数量性状的调查 标记柠条锦鸡儿特定枝条上花朵开始开花的时间,在自然条件下连续定位观察并记录花朵的开放进程,直至花瓣脱落.注意观测花朵每一结构的数目、形状、颜色及它们的时空动态,记录花朵开放、花粉散出、柱头伸长等开始出现和持续的时间.随机采集30朵盛开的花,分别测量其花柄长度,花冠的长度、宽度和高度,旗瓣的长度和宽度,翼瓣的长度和宽度,龙骨瓣的长度和宽度,雄蕊高度,柱头高度,花丝长度,雌蕊长度。 解决核心问题的途径 访花者的观察 于晴天、无风或微风日,选择相隔一定距离的3—5个柠条锦鸡儿花枝,每天9:00至19:30期间,每隔30 min观察记录一次其上的访花者,记录30 min内访花者的种类、访花次数、访花行为,计算访花频率.用捕虫网捕捉昆虫,放入含乙醚的玻璃瓶中,带回实验室进行鉴定。 解决核心问题的途径 花粉活力的检测 用TTC(2,3,5-triphenyl tetrazolium chloride)法测定花粉活力u :将散粉不同时间的花粉撒在载玻片上,滴加含0.5%TTC的蔗糖溶液,迅速加上盖玻片,置入内有湿滤纸的平皿中,连同平皿放置在37℃ 黑暗环境条件下2 h.统计盖片中央部位3—5个视野中全部观察花粉内红色花粉所占比例.每次随机选用5朵花,重复3次. 解决核心问题的途径 柱头可授性的检测 用联苯胺一过氧化氢法检测柱头可授性 .具体方法:在盛花期,每天10:00—14:00,采下开花后不同时间的花朵,将柱头浸入凹面载玻片中含有反应液(1%联苯胺:3% 过氧化氢:水=4:l1:22体积比)的凹面处.若柱头具有可授性(呈现出过氧化氢酶活性),则降解过氧化氢,氧化联苯胺,导致柱头周围的反应液呈现蓝色并有大量气泡出现.每次随机选用5朵花,重复3次. 解决核心问题的途径 杂交指数(OCI) 的估算 解决核心问题的途径 花粉一胚珠比(P/O)的估算 选取花开而花药未裂的花带回实验室,将其花药挤碎于0.9 ml乙醇+3滴染料(醋酸洋红染色液或0.5%亚甲蓝染液)+4滴去垢剂的液体中.将挤碎的花药转移到刻度指管中,仔细冲洗花药壁、镊子和刀片以防材料丢失,用相同的乙醇/去垢剂溶液定容到1 ml,摇匀,用微量进样器吸取2 L于载玻片上,在显微镜下计数其中的全部花粉粒,重复6次,并计算单个花药中的平均花粉粒数,乘以每花的花药数,得到花粉总数.用刀片横切子房,记录胚珠数目。 据Cruden(1977)的标准: P/O为2.7~5.4 时,闭花受精;18.1~39.0 ,自交;31.9~396.0,兼性自交;244.7~2588.0 ,兼性异交;2108.0~195525.0,异交; 解决核心问题的途径 套袋、去雄及人工授粉试验 (1)对照:不套袋、不去雄、自由传粉,检测自然条件下的传粉率;(2)自发的自花传粉:开花前套袋、不去雄,检测是否需要传粉者;(3)诱导的自花传粉:去雄、套袋,同株异花之间传粉,检测有无自交不亲和系统及能否人工同株异花受精;(4)人工异花传粉:套袋、去雄、用不同无性系植株的花粉进行异花传粉,检测杂交是否亲和;(5)自然条件下的异花传粉:不套袋、去雄、自由传粉,检测座果率是否受传粉者限制;(6)检测无融合生殖:套袋、去雄、不授粉,检测花的无性生殖率. Diagram 开花动态 柠条锦鸡儿的花蕾,初为绿色,花冠刚露出花萼时,花蕾长10 mm左右.花蕾长15-20 mm时,花冠呈黄色,只有旗瓣中部还保留些许绿色.2—3 d后,花蕾长25—30 mm时,花冠全部变为黄色,即将开放.柠条锦鸡儿单朵花的花期约为6 d.花瓣开裂之初,花药橘黄色、未开裂,柱头未伸出花冠.开花当天的上午9时前后,花瓣开始开裂、花药散粉,此时,花瓣黄色,访花者开始频繁出没.到下午3时,花部完全展开,花药散粉基本完毕.2 d时,花冠仍然鲜艳,花蜜较多,有访花者频繁访问.3 d时,花瓣开始褪色,部分药壁脱落,仍有花蜜分泌,仍有访花者访问.4-5 d时,花冠开始变干、有些花的花冠脱落.6 d时,多数花朵花冠开始脱落,子房明显膨大。 访花者 花粉活力和柱头可授性 杂交指数和p/o比
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