生理实验。.doc

实验一 离体蛙心灌流 一．目的：观察各种理化因素对心脏活动的影响。 二．原理：内环境稳定是维持心脏正常活动的基础。当内环境发生改变则会影响心脏的活动。 三．方法内容 1． 破坏蛙的脑和脊髓、打开胸腔暴露心脏，在主动脉下穿线备用，在主动脉球上1/3处剪一小口，将灌流管尖端插入心室结扎。 2． 用蛙心夹夹住心尖， 3． 观察正常的心搏曲线。 四．结果与分析 1．加1%CaCl2 加强加快 细胞外液高Ca2+ →基线上移、舒张不全。最后停止在舒张期呈现“钙僵”。 心肌细胞内Ca2+ ↑ →兴奋—收缩偶联过程↑→收缩力↑。因为细胞内高Ca2+超过钙泵运转能力→Ca2+与肌钙蛋白结合不易分解，因此高Ca2+下收缩加强加快。 2．加KCl 减弱减慢 细胞外液K+↑→K+ 竞争性的抑制Ca2+内流、另一方面膜对K+通透性↑→负极过程中钾离子外流↑→平台期缩短→进入血浆中的Ca2+↓→兴奋—收缩偶联过程↓→收缩力↓ 3.加0.01%肾上腺素 加强加快 肾上腺素与心肌细胞膜上的β受体结合，激活腺苷酸环化酶cAMP可使细胞膜Ca2+通道开放。Ca2+内流心肌收缩↑ 4．滴加3%乳酸 减弱减慢 氢离子与钙离子有竞争肌钙蛋白。当氢离子浓度升高时氢离子与肌钙蛋白结合增多，而钙离子与肌钙蛋白结合减少。心肌收缩减弱减慢。 5．滴加0.01%乙酰胆碱 减弱减慢 乙酰胆碱与心肌细胞膜上的M受体结合，膜对钾离子通透性增强，钾离子外流增多，钙离子内流减少。心肌收缩减弱减慢。 6.滴加2.5%碳酸氢钠 加强加快 碳酸氢钠中和氢离子后解除氢离子对心肌收缩的抑制作用，钙离子与肌钙蛋白结合。心肌收缩加强加快。 实验二.蛙心收缩的记录和心肌特性及骨骼肌的特性 目的：了解心肌和骨骼肌的某些特性并掌握其记录方法。 原理：心肌的特性之一是有效不应期长。绝对不应期占据了整个收缩期和舒张早期。心肌还有“全或无”的特征。肌肉当受到刺激时产生兴奋便表现出收缩活动反映。但并非任何强度的刺激都能引起肌肉收缩反应，而必须达到强度的阈值。 方法内容： （一）蛙心收缩的记录和心肌特性 1.用蛙针破坏脑、脊髓使其完全瘫软打开胸腔暴露心脏。 2.用蛙心夹夹住心尖、提起与换能器连接。适当的调节连接张力感受器的线的距离和紧张度。3.将刺激电极接触心室。观察正常的心肌收缩曲线。 4.在收缩期给予刺激 结果：心肌收缩曲线没有变化。 原因：由于心肌的绝对不应期较长，占据了整个收缩期和舒张早期，在此时给予任何刺激时心肌没有任何变化。 5.在舒张中后期给以刺激 结果：在正常收缩以外产生了一次期外收缩随之有个较长的间歇。 原因：在心室有效不应期后受到一次额外刺激而产生期前兴奋所引起的收缩。正常的静脉窦兴奋传导到心肌时正好落在期外收缩绝对不应期内，因而不能引起心室肌兴奋和收缩形成的。 （二）心肌的“全或无”现象 从主动脉下穿线在静脉窦与心房之间的半月线做一个结扎。俩栖类的动物的起搏点位于静脉窦，哺乳动物的静脉窦退化有窦房结作为起搏点。由于静脉窦发出的兴奋被阻断，心脏停止调动。 在组织血中我们学过心肌细胞之间由闰盘连接。闰盘是负电阻区，当心肌受到刺激时首先引起闰盘兴奋传给相邻的细胞，有一个细胞传给另一个细胞，引起整个心房或心室所有细胞同时收缩，使心房或心室构成机能合包体。 对于心肌而言，阈下刺激不能引起心肌收缩，当刺激达到阈刺激时，可使心肌细胞同步收缩。所以心肌一旦发生收缩它的收缩就达一定的强度，而表现“全或无”是收缩。 （三）腓肠肌标本的制作 在第一与第二腰椎出将蛙横断，将多余的内脏组织剪除，剥离皮肤。用玻璃棒把脊神经分离，在脊柱正中将标本分离，分离坐骨神经，将分枝剪除，在大腿背侧的半膜肌与股二头肌之间用玻璃棒分离出坐骨神经。在跟腱上结扎，在膝关节下方其它所有组织剪去。拿大头针在膝关节处将其固定在蛙板上。 （四）骨骼肌的特性 1.刺激强度与收缩反映 运动单位：一个神经元及其传出神经纤维所支配的所有肌纤维组成一个神经元。 当刺激强度不能兴奋神经元支配的肌纤维时不能产生收缩反映——阈下刺激。 当刺激强度增加。神经元支配的肌纤维数增加，刚好引起骨骼肌产生收缩——阈刺激。 随着刺激的强度的增加，神经元支配的肌纤维数不断增加。当刺激强度达到一定强度时，其支配的肌纤维数不变，骨骼肌收缩幅度不变——最大刺激。 2.刺激频率与收缩反应 单收缩：由潜伏期、收缩期、舒张期组成。 随着刺激的频率的增加其收缩频率不断增加。达到一定程度时，肌纤维持续收缩不舒张。 若给予连续刺激，后一个刺激落在前一个刺激所引起肌肉收缩的舒张期内则形成不完全强直收缩。如果后一个刺激落在前一