生物化学实验常用试剂的配制方法.doc

生物化学实验常用试剂的配制方法1、0.5mol/L 氢氧化钠溶液 *组份浓度 0.5mol/L *配制量 2L *配置方法 1.准确称取氢氧化钠 40g。 ????????? 2.用去离子水溶解并稀释至 2L。 2、0.5mol/L 盐酸溶液 *组份浓度 0.5mol/L *配制量 2L *配置方法 1.准确量取盐酸 83.4mL。 ????????? 2.用去离子水稀释至 2L。 4、0.2％葡萄糖标准溶液 *组份浓度 0.2％ *配制量 1L *配置方法 1.称取葡萄糖 2.5g 置于称量瓶中，在 70℃干燥 2 小时。 ????????? 2.干燥器中冷却至室温，重复干燥，冷却至恒重。 ????????? 3.准确称取葡萄糖 2.000g。 ????????? 4.用去离子水溶解并定容至 1L ????????? 5.于 4℃保存。 5、250μg/mL牛血清 *组份浓度 250μg/mL白蛋白标准液 *配制量 2L *配置方法 1.准确称取 250mg标准牛血清白蛋白。 ????????? 2.用 0.03mol/LpH7.8 的磷酸缓冲液溶解并定容至 1L。 ????????? 3.4℃保存。 6、Folin 试剂甲 *配置方法 1.称取 10g氢氧化钠溶于 400mL去离子水中，加入 50g 无水碳酸钠，溶解，待用。 ????????? 2.称取 0.5g酒石酸钾钠，溶于 80mL去离子水中，加入 0.25g 硫酸铜.5水，溶解。 ????????? 3.将 1：2：去离子水按 20：4：1的比例混合即可。 ????????? 4. 4℃保存，可用一周。 7、Folin 试剂乙 *配置方法 ???? 1.在 500mL的磨口回流装置内加入钨酸钠.2水 25.0359g， 钼酸钠.2水 6.2526g，去离子水 175mL，85％磷酸 12.5mL， 浓盐酸 25mL，充分混合。 ????? 2.回流 10 小时，再加硫酸锂 37.5g，去离子水 12.5mL及数滴溴。 ????? 3.然后开口沸腾 15min，以驱除过量的溴，冷却后定容到 250mL。 ????? 4.于棕色瓶中保存，可使用多年 注意：上述制备地 Folin 试剂乙地贮备液浓度一般在 2mol/L 左 右，几种操作方案都是把 Folin 试剂乙稀释至 1mol/L 的 浓度作为应用液， 我们这时是把贮备液于使用前稀释 18 倍，使之浓度为 0.1mol/L 略高。这种稀释 18倍后的Folin 试剂乙就是上文称之为的 “应用液 ”。Folin 试剂乙贮备 液浓度的标定，一般是以酚酞为指示剂。用 Folin 试剂乙去滴定 1mol/L 左右的标准氢氧化钠溶液，当溶液颜色由红变为紫灰，再突然变成墨绿即为终点，如果用氢氧化钠去滴定 Folin试剂乙，终点不太好掌握，溶液地颜色是由浅黄变为浅绿，再变为灰紫色为终点。 8、DNS试剂 *配置方法 1.取 3，5二硝基水杨酸 10g,加入 2mol/L 氢氧化钠溶液 200mL。（3，5二硝基水杨酸试剂） ????????? 2.将 3，5二硝基水杨酸溶解，然后加入酒石酸钾钠 300g。 ????????? 3.待其完全溶解，用去离子水稀释至 2000mL，棕色瓶保存。 9、5％蔗糖溶液 *组份浓度 5％ *配制量 1L *配置方法 称取蔗糖 50g，用去离子水溶解定容至 1L。 10、0.1mol/L 蔗糖溶液 *组份浓度 0.1mol/L *配制量 1L *配置方法 称取蔗糖 34.230g，用去离子水溶解并定容至 1L。 11、20％乙酸溶液 *组份浓度 20％ *配制量 1.2L *配置方法 量取冰乙酸 300mL，用去离子水稀释至 1200mL。 12、30％（W/V）Acrylamide *组份浓度 30％（W/V）Acrylamide 0.05％ *配制量 1L *配置方法 1.称量下列试剂，置于 1L烧杯中 Acrylamide 290g BIS 10g ????????? 2.向烧杯中加入约 600mL的去离子水，充分搅拌溶解 ????????? 3.加入去离子水将溶液定容至 1L，用 0.45μm滤膜滤去杂质。 ????????? 4.于棕色瓶中 4℃保存。 注意：丙稀铣胺具有很强的神经毒性，并可通过皮肤吸收，其作用有积累性，配制时应戴手套等。聚丙烯酰胺无毒，但也应谨慎操作，因为有可能含有少量的未聚合成份。 13、40％（W/V）Acrylamide *组份浓度 40％（W/V）Acrylamide 0.05％ *配制量 1L *配置方法 1.称量下列试剂，置于 1L烧杯中 Acrylamide 3