第二章基因工程制.ppt

第四章 基因工程制药 第一节 概述 基因工程药物是指利用基因工程技术研制和生产的药物，主要包括： 免疫性蛋白 细胞因子 激素 酶类 反义核酸类药物 基因工程制药的特点 1、大量生产过去难以获得的生理活性蛋白和多肽，为临床使用提供有效的保障； 2、可以提供足够数量的生理活性物质，以便对其生理、生化和结构进行深入的研究，从而扩大这些物质的应用范围； 3、可以发现、挖掘更多的内源性生理活性物质； 4、内源生理活性物质在作为药物使用时存在的不足之处，可通过基因工程和蛋白质工程进行改造和去除； 5、可获得新型化合物，扩大药物筛选来源。 第二节 基因工程药物生产过程 1 基因工程菌株的构建※ Replication 复制：亲代DNA或RNA在一系列酶的作用下，生成与亲代相同的子代DNA或RNA的过程。 Transcription 转录：以DNA为模板，按照碱基配对原则将其所含的遗传信息传给RNA，形成一条与DNA链互补的RNA的过程。 Translation 翻译：亦叫转译，以mRNA为模板，将mRNA的密码解读成蛋白质的AA顺序的过程。 Reverse translation 逆转录：以RNA为模板，在逆转录酶的作用下，生成DNA的过程。 （1）脱氧核糖核苷酸——DNA 双螺旋结构模型（ Watson Crick 模型） 1. DNA分子是由两条方向相反的平行多核苷酸链构成； 2. 碱基均在主链内侧，A与T配对，G与C配对，依靠碱基之间的氢键结合在一起，“半保留复制” 3. 成对碱基处于同一平面，与螺旋轴垂直，双螺旋的平均直径为2nm，核苷酸之间的夹角为36度，每转1周有10个碱基对，螺距为3.4nm； 双链DNA分子较硬，呈比较伸展的结构。 （2）RNA的功能 rRNA： rRNA与蛋白质一起组成核糖核蛋白体（核糖体），作为蛋白质生物合成的场所; mRNA： mRNA作为蛋白质合成的模板，由其分子上的三联体密码控制蛋白质分子中氨基酸的排列顺序； tRNA：在蛋白质生物合成的过程中，转运氨基酸到核糖体-mRNA复合物的相应位置。 （3）DNA的复制 半保留复制 半不连续复制 需要DNA聚合酶和各种蛋白的参与 与DNA复制有关的物质 原料：四种脱氧核苷三磷酸（dATP、dGTP、dCTP、dTTP)； 模板：以DNA的两条链为模板链，合成子代DNA； DNA聚合酶:以DNA为模板的DNA合成酶※ ●以四种脱氧核苷酸三磷酸为底物 ●反应需要有模板的指导 ●反应需要有3?-OH存在 ●DNA链的合成方向为5 ? ? 3 ? 引物 （4）转录过程的特点 （5）蛋白质合成的几个要素 mRNA是带有DNA遗传信息指导蛋白质合成的直接模板。mRNA分子中的核苷酸排列顺序转变成蛋白质分子中的氨基酸排列顺序。 2 工程菌的培养 工程菌大规模发酵方式及最佳参数的确定 生物反应器的研制与控制 发酵工程产物的分离纯化 3 基因工程药物的质量控制 生物材料的质量控制 培养过程的质量控制 纯化过程的质量控制 目标产品的质量控制 产品的保存 Table of Contents Related Documents Competitors You may want to allocate one slide per competitor Strengths Your strengths relative to competitors Weaknesses Your weaknesses relative to competitor Related Documents Related Documents Related Documents Related Documents text1 text2 text4 text3 Your company slogan LOGO 基因工程 菌株的构建 基因工程药物 质量检定 上游阶段 下游阶段 工程菌的培养 目的基因的表达 重组子的筛选 转化受体细胞 构建DNA重组体 目的基因的克隆 重组DNA技术过程 中心法则 (The Central Dogma) 转 录 翻 译 逆转录 复 制 2、相关分子生物学基础 AGAACTT TCTTGAA AGAACTT TCTTGAA TCTTGAA AGAACTT 母代DNA 子代DNA 1）转录的不对称性：在RNA的合成中，DNA的二条链中仅有一条链可作为转录的模板，称为转录的不对称性。 反义链 antisense strand（无意义链，负链）：在RNA的转录中，用作模板的DNA链称为反义链。 有义链 coding strand（编码链，正链）：在RNA的转录中，不作为模板的DNA链称为有义链