骨髓问充质干细胞在致敏小鼠体内的示踪归巢实验.pdfVIP

第32卷 第6期 中山大学学报 (医学科学版) Vol_32 No．6 2011年 11月 JOURNALOFSUNYAT-SENUNIVERSITY(MEDICALSCIENCES) NOV． 2011 骨髓间充质干细胞在致敏小鼠体内的示踪归巢实验 洪冬玲 ，吴燕峰 ，许吕宏 ，方建培 (中山大学孙逸仙纪念医院 1．儿科，2．生物治疗中心 ，广东广州 510120) 摘 要：【目的】了解骨髓间充质干细胞在以异基因脾细胞输注致敏小鼠体内的归巢情况。 【方法】正常同种异基因小鼠 骨髓间充质干细胞 的体外培养及鉴定后，体外予羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯荧光染料标志 ，经尾静脉注射到致敏组 和非致敏组小鼠体内(每组 10只)，在 6h、24h和48h处死动物，分别应用冰冻切片和流式检测方法了解骨髓间充质干细胞 在各个脏器的分布情况。 【结果】冰冻切片和流式检测结果均表明骨髓间充质干细胞在致敏小鼠体内迅速和持久在脾、肝脏 聚集，而非致敏动物却没有明显聚集到肝脾等脏器，而是最终归巢到了骨髓。其中流式细胞仪定量结果表明：6h时致敏小鼠 脾脏荧光阳性细胞为 (3．78±0．66)％，与同期正常小鼠脾脏结果比较 PO．05，有统计学意义 ；而在48h时致敏小鼠骨髓荧 光阳性细胞为(0．43±0．35)％，同期正常小鼠骨髓为(5．40±1．58)％，两者比较P0．05，有统计学意义。 【结论】应用异基因 脾细胞致敏的小鼠体内肝脾等免疫脏器明显受到致敏影响 ，其对骨髓间充质干细胞体内归巢的定位具有很高的趋化吸附作 用，中止了骨髓间充质干细胞正常状态下向骨髓的归巢。 关键词 ：致敏小鼠：骨髓问充质干细胞 ；归巢示踪 中图分类号：R457 文献标志码 ：A 文章编号 ：1672—3554(2011)06—0708—05 BoneM arrow M esenchymalStem CellsHominginSensitizedM ice HONGDong-ling，WUYan—feng，XULii—hong，FANGJian—pei (1．DepartmentofPediatrics；2．BiotherapyCenter，SunYat—senMemo~Hospital，SunYat-senUniversity，Guangzhou510120，China) Abstract：O【bjective】Toexplorethehomingcharacteristicsofbonemarrowmesenchymalstemcells(MSCs)intheallogeneic splenocytessensitizedmice．M【ethod】AfternormalallogenebonemarrowMSCswereculturedandevaluated，MSCswerelabeledby 5一and6-carboxyfluoresceindiacetatesuccinimidylester(CFSE)invitro．AfterinjectedCFSElabeledMSCs(CFSE+cells)through venacaudalisin6，24，and48h，homingtracewereexploredinthedifferentorgansbothin thesensitizedandnormalmicegroup (eachgroup10samplesmice)throughfrozensectionandflowcytometry(FCM)detectionmethods．【Results】Bothinthemethodsof frozensectionandFCM ，wediscoveredinthesensitizedmicegroupMSCswereaggregatedandhominginspleenandliverquicklyand lastingly，whileinthenomr almicegroupMSCswerehomingtothebonemarrow intheend．AmongthoseFCM quantitativeresult，in 6hthepe