周围微生物检测观察实验报告.doc

周围微生物检测观察实验报告 汽车14班 张建宇 2011010780 实验时间20011年10月16号 同组成员：马跃 陈浩 A实验原理：1.微生物的的分离与纯化：从混杂的微生物群体中获得只含某种或某一株微生物的过程。根据微生物对营养，酸碱度，温度和氧气的要求条件不同，供给他适宜的培养，或者加入某些抑制剂造成抑制其生存的条件，从而淘汰其他细菌的生长，再用稀释涂布平板法或稀释后平板划线分离，纯化该微生物，直至得到纯的微生物。 2.平板菌落计数法是将待测样品竟是当d稀世之后。其中的微生物充分分散成单个细胞，取一定量的稀释样液接种到平板上，经过培养，由每个单细胞生长繁殖而形成肉眼可见的菌落，即一个菌落应代表原样品中的一个单一细胞。统一菌落数，根据其稀释倍数和取样接种量即可换输出样品中的的含菌数。 平板菌落计数法虽然操作较繁杂，结果需要培养一段时间才能取得，而且测定结果已受多种因素的影响，但是，由于该计数方法的最大优点是可以活的活菌的信息，所以被广泛运用于生物制品检验（如活菌制剂），以及食品，饮料和水（包括水源）等的含菌指数或污染程度。 B实验材料：菌源:土样10g 牛肉膏蛋白胨培养基12个 1000ul 、200ul各一支 培养箱 C实验试剂：生理盐水,作100倍稀释用0.9% 无菌生理盐水 250ml三角瓶中装99ml生理盐水,每瓶加约20粒玻璃珠250ml三角瓶中99ml 实验用具：平皿;涂棒;无菌200ul, 1000ul吸头;记号笔,酒精灯; D实验步骤：1. 采土样: 选择肥沃土壤,去表层土,挖5~20cm深度的土壤数10g,装入烧杯,带回实验室 2. 制备土壤稀释液; 称取土样1.0g， 放入盛99ml无菌水并带有玻璃珠的三角瓶中，用手振荡5min使土壤均匀分散成为土壤悬液（10-2）。用1ml的无菌吸头从中吸取1ml土壤悬液，注入事先分装有99ml无菌水的试管中，吹吸3次，振荡均匀（10-4）。 3. 涂布 用一支的无菌吸头，吸取10-4浓度土壤稀释液100ul，较均匀地放入已写好稀释度的牛肉蛋白胨培养基平板上，用灭过菌的无菌玻璃涂棒涂匀。每个同学1个平板。 4．培养 将牛肉蛋白胨培养基平板倒置于350C温箱中培养24h；统计所长出的菌落数； 5. 菌落计数 有较大片菌苔生长时,弃用,以无片菌苔生长的平皿计???; 若成片菌苔大小不到培养皿的一半,其余一半分布均匀,将此一半计数*2; 6. 菌落计数 土壤微生物含量=平板平均菌落数x105 E实验结果：这是用牙垢画的线长出的菌落，初步估计有50-60个 这是泥土中的细菌长成的菌落，虽然堆积混乱，但是根据 若成片菌苔大小不到培养皿的一半,其余一半分布均匀,将此一半计数*2的原则。可以数出大约有120-150个菌落，折合成土壤微生物含量在1.2-1.5*10^7 这是豆浆的菌落图由于大量菌落堆积，无法数清具体数量。 这是敞口10min的图片，我们可以清晰的看到10个菌落。 F实验讨论：1.我的土壤实验中出现了多个菌种，其中还有一个黄色的菌种且扩散的很快，说明在某一个相同的生存坏境中，可以同时存在多个菌种，也表示了在这些菌种中，生在繁殖的快慢是不一样的。 2.我的几乎每一个平板的一圈都有明显的污染杂菌，这给我们两点启示，其一就是在排除外菌干扰的时候要特别注意边缘的清理，其二涂抹实验物的时候要涂抹均匀。 3.注意一些极易导致实验误差的变量，如实验过程中同学与同学之间的交流应该尽量避免正对培养皿，同时试验之前注意洗手（虽然实验中证明了即使洗手也不会对微生物的存在构成影响）但是可以保证单一变量的稳定，使每个同学之间的实验误差降低到最低。 4.在放置培养皿的时候请注意正反面的正确位置，向上的方向注意要是有培养琼脂的一面，这样是为了水蒸气不影响微生物的呼吸作用。 固定化酵母细胞发酵啤酒实验 A实验原理：1.将生物酶或细胞固定在一定的基质上,从而提供酶或细胞的利用效率; 2.固定化技术生产啤酒固定化细胞能重复使用;发酵后菌体与发酵液易于分离;后处理工艺简单,成本低;可连续发酵,过程自动化3包埋法固定化技术的一种;将微生物细胞均匀的包埋在水不溶性载体的紧密结构中,细胞不易漏出;制定固定化细胞时,细胞和载体不起任何反应,细胞处于最佳生理状态;固定化细胞有载体为屏障,可避免外界不利因素的影响。 B实验仪器材料和用具：啤酒酵母，100ml麦芽汁(8%~10%)/250ml三角瓶，2.5%海藻酸钠溶液5ml,灭菌;1.5% CaCl2 50ml,灭菌;0.9% 无菌生理盐水, 50ml；无菌滴管;无菌玻璃棒;无菌封口膜封好的100ml三角瓶。 C实验步骤：1.菌体培养 将培养24h 的新鲜斜面菌种,接种于三角瓶中培养; 2.细胞固