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微量移液管的使用
移液器使用与维护操作程序
一、目的
保证移液器加样的准确性。确保移液器加样的精确性和准确性。
二、原理
可调移液器是连续可调的通用微量移液器, 适用于液体的精确取样和转移。采用空气置换原理, 利用可拆卸一次性管嘴转移液体。移液器由定位部件、容量调节指示部分、推顶装置、活塞套和吸液嘴等组成。采用高强度、无污染、抗化学腐蚀的高分子材料制成。
三、主要操作规程
1、设定容量值:根据所需取液量选择相应的加样器;可调式移液器应在允许容量范围内调节。 连续可调式移液器容量计读数由三位拨号数字组成(显示所转移液体容量),从上(最大有效数字)到下(最小有效数字)读取;利用底部刻度可将容量刻度调节到更精确的分度。
本室使用Finnpipette(F型)移液器是连续可调的、计量和移液的专用仪器。移液器有各种不同的型号,F右下角数字为移液器最大容量值,代表移液器的型号已标明在按钮上。容量范围自0.5 (L至1000 (L(各型号容量范围见括号内)。 F10(0.5—10 (L)?、? F50(5—50 (L)??、 F200(20—200 (L)??、 F1000(200—1000 (L)? 以此类推。F型移液器的应用范围F10:?超微量计量及移液,应用于DNA定序及酶分析等。F50、F 200 和F1000:?应用于一般水溶液、酸、碱的计量和移液。
2、吸液和放液:首先选择一支合适的吸嘴安放在移液器套筒上。稍加扭转地压紧吸头使之与套筒间无空气间隙。未装吸头的移液器绝不可用来吸取任何液体。最常用的吸液和放液方式有两种。
2.1 吸液放液
2.1.1 吸液:把按钮压至第一停点; 垂直握持移液器,使吸嘴浸入液样中,浸入液体深度视型号而定:? F10 ≤1mm? F50 和F40 2--3mm? F200 和F1000 ??????2--4mm缓慢、平稳地松开按钮,吸液样,待移液器吸满液体后等一秒钟,然后将吸嘴提离液面,贴壁停留2-3秒,使管尖外侧的液滴滑落。
2.2.2 放液:将吸嘴贴到容器内壁并保持10—40度倾斜。平稳地把按钮压到第一停点,放出液体,等1-2秒钟后把按钮压到第二停点以排出剩余液体。压住按钮,停留1-2秒钟,提起移液器,松开按钮。按吸嘴弹射器除去吸嘴。(只有改用不同液体时才需更换吸嘴。)
3、预洗:当取液体积大于10 (L时,为了保证吸液的精密度和准确性,装上一个新吸嘴(或改变吸取的容量值)时应预洗吸嘴,即先吸入一次液样并将之排回原容器中,反复2-3次。这是因为第一次吸取的液体会在吸嘴内壁形成液膜,导致计量误差。而同一吸嘴在连续操作 时液膜相对保持不变,故第二次吸液即可消除误差。
而当液体体积小于10 (L,只有在没有预洗,同时要将吸取的液体在要转入的液体中反复吸打几次,排空液体,再将吸嘴提出并贴壁停留1-2秒,才能保证取液的精密度和准确度。
4、致密及粘稠液体:对于密度低于水的液体,可将容量计的读数调到低于所需值来进行补偿。例如:用F50移液器转移10 (L血清。先将读数调到10 (L,吸取后以重量法测定。如实测体积为9.5 (L,即偏差0.5 (L,则将读数调到10.5 (L并重复一次。如第二次仍不够准确,根据偏差再作调整。
排放致密或粘稠液体时,宜在第一停点多等一两秒钟再压到第二停点。
5、移液器吸头5.1 生产过程纯净,符合当今无染料的要求(避免污染)。
5.2 经改进的外形(密封良好的环口、薄壁和嘴口尖细)使按装或卸脱更加容易、管壁有弹性、不会产生漩涡,从而精度更高。5.3 嘴口决无毛刺。吸嘴表面光洁平滑,沾湿性小,避免液体留外壁引起的误差。5.4 有液体容量刻度线。D200吸嘴在20和100 (L处、D1000吸嘴在300 (L处、D10吸嘴在 2 (L 处标出。5.5 可在121℃及1巴压力下消毒20分钟。5.6 应选用带滤芯的吸头,以避免样品与样品、样品与移液器或样品与操作人员的污染。6、注意事项移液器在使用时应注意以下几点:6.1 在取液前所取液体应在室温(15—25℃)平衡;若吸液温度与室温有异时将吸头预洗多次再用。注意移液温度不得超过70℃。6.2 吸头浸入液体深度要合适,吸液过程尽量保持不变。6.3 在吸取液体时应缓慢匀速吸取,避免液体溅到移液器头上。6.4 在调整取液量的旋钮时,不要用力过猛,并注意计数器显示的数值不要超过其可调范围。6.5 连续可调式移液器在取样加样过程中应注意吸嘴不能触及其它物品,以免被污染;吸嘴盒(架子)、废液瓶、所取试剂及加样的样品管应摆放合理,以方便操作过程、避免污染为原则。6.6 改吸不同液体、样品或试剂前要换新吸嘴;发现吸嘴内有残液时要换新吸嘴。
6.7 新吸嘴使用前要预洗。6.8
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