猪肝中单胺氧化酶B的分离纯化-色谱.PDF

! # 年$ 月 !#$ !% %$ $ ’()’*+’, ! # !#$%% ’()*$+, (- !*(.+/(0*+1 2 %! ’ %( 研究论文 -./ ：# $ )!*0 1 $ 2 $ ##!) $ ! # $ %! 猪肝中单胺氧化酶! 的分离纯化 孙嘉怡，- 任- 军，- 徐- 丽，- 贾凌云! （大连理工大学生命科学与技术学院，辽宁 大连 ##(!* ） 摘要：依据单胺氧化酶 （*=6*7=’ ?7:6@’ ，AB . ）的疏水特性，建立了一种从猪肝中分离纯化 AB . 的新 方法。用含有 #C 3,7)= D5 # 的膜蛋白裂解液制备粗酶，以饱和度为!C ’ +C 的硫酸铵反抽提进行粗提，再利 用自制的配基密度为+. !*#0 *E 的苯基疏水色谱及’(F6,@’ G H7IF 1’,J,*6=’ 离子交换色谱进一步分离 纯化，得到纯化倍数为 #%. ! 、酶比活为 #)+ K0 *I 的AB . 。十二烷基硫酸钠5 聚丙烯酰胺凝胶电泳（-5 1B L4 ） 分析显示为相对分子质量约( 的单一蛋白质带。采用高效液相色谱5 电喷雾串联质谱对该酶进行鉴定，证实 为 AB . 。本研究所用分离纯化方法可以有效纯化 AB . ，为AB . 的深入研究提供技术支撑。 关键词：苯基配基；疏水色谱；阴离子交换色谱；单胺氧化酶 ；猪肝 中图分类号： .(+%- - - 文献标识码：B- - - 文章编号：#5% #) （! # ）$5%!5+ #$%%’()%*+ * ,*+*(,%+- *.%/(0- ! $*, 1*$’%+- 2%3-$ K% 27687 ，M4% 2;= ，DK E7 ，2/B E7=I8;= ! （! # $% ’ ( )* + ,* -.,(. $(/ 0 ,).1()2)34 ，! $2,$( 5(,6%7,4 )* 8.1()2)34 ，! $2,$( !!#$% ，91,($ ） 450)$(’) ：A=6*7=’ ?7:6@’ （AB. ）N6@ (;,7J7’: J,* (,7=’ #7O’, +8 @#;+7#7P6)7= N7)F #8@7@ +;JJ’, =)67=7=I #C 3,7)= D5 # ，(,’7(7)6)7= N7)F !C / +C 6**=7;* @;#J6)’ ， 7@#6)7= N7)F F8:,(F+7 F,*6)I,6(F8 6=: 6=7= ’?F6=I’ F,*6)I,6(F8 $ 3F’ (;,7J765 )7= J#: N6@ #%. ! $ 3F’ @(’7J7 6)7O7)8 N6@ #)+ K0 *I $ 3F’ (;,7J7’: ’=P8*’ 6((’6,’: F*I’5 =’;@ +8 @:7;* ::’8# @;#J6)’5(#86,8#6*7:’ I’# ’#’),(F,’@7@ （-5 1B L4 ），6=: 7) F6: 6 ,’#6)7O’ *#’;#6, *6@@ J 6+;) ( $ 3F’ 7:’=)7J76)7= J )F’ ’=P8*’ N6@ =J7,*’: +8 F7IF (’,J,*6=’ #7Q;7: F,*6)I,6(F85 ’#’),@(,68 7=7P6)7= )6=:’* *6@@ @(’),*’),8 （H1ER5 4/5 A0 A ）$ B@ AB.