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宁波市第九医院检验科管理文件
分析项目SOP文件 编号:LJ-FXXMSOP-01/01 版本:2010-A/0 生效日期 一、Sysmex XT-1800i型血液分析仪分析项目标准操作规程 1 检验申请
血液学分析是组合项目。
2 标本采集和处理
2.1 采血前受检者安静,环境温暖,防止静脉挛缩。用器.0ml,置于含150g/L EDTA-K2,颠倒混匀抗凝,及时送检。检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。
采血后在4h内完成检测。置室温即可,不能放置4~8℃环境(血小板易被激活发生聚集)。已的标本保持完整的编号保存。
3.1鞘流DC检测方法(RBC、PLT、HCT)
在该检测器内,样品喷嘴定位在孔的前面且与中心对齐。将稀释后的样品由样品喷嘴推入锥形室以后,由前鞘流内的试剂包裹通过小孔的中心。通过小孔以后,经过稀释的样品由后鞘流中的试剂包裹送入捕集管中。这样就可以防止该区域的血细胞回流,并防止产生假性血小板脉冲。鞘流方法改善了血液计数的准确性和重现性。同时由于血细胞通过在一条直线上的小孔,所以也可防止产生异常血细胞脉冲。
3.2使用半导体激光器的流式细胞计数方法
使用流式细胞计数法检测细胞和其它生物粒子的物理和化学性质。使用流式细胞计数法只需很少的样品就可对这些细胞和粒子进行检测。一个血液样品经过吸液和定量、稀释至指定的稀释比,并进行染色。然后将该样品送入流动池中。这种鞘流装置改进了细胞计数的准确性和重现性。同时,由于血细胞颗粒成行通过该流动池的中心,故而防止产生异常血液脉冲并可减少流动池的污染。一个半导体激光束通过该流动池照射到血细胞上。前向散射光由光电二极管接收,侧向散射光和侧向荧光则由光电倍增管接收。光信号被转化为电脉冲,从而可以得到有关血液细胞的信息。
3.3前向散射光和侧向散射光
当一束激光照射到血细胞颗粒上时,就产生光散射。XT-1800i检测前向散射光和侧向散射光,前向散射光的强度反映血液细胞体积大小。侧向散射光的强度反映细胞内部(如细胞核的体积大小)的信息。
侧向荧光
3.4当光照射到经过荧光染色的血液细胞上时,就产生比入射光波长更长的光。随着染色集团浓度的增加,荧光强度也增加。通过测量荧光强度,可以得到有关血细胞染色的信息,XT-1800i检测侧向荧光。
3.5 SLS-血红蛋白测定法
在稀释的血液中加入溶血素,红细胞中的血红蛋白被释放出来。血红蛋白在月桂洗硫酸钠的作用下,二价铁转变成三价铁,并与月桂洗硫酸钠结合形成SLS-Hb,SLS-Hb进入血红蛋白检测系统。测定SLS-Hb在555nm波长下的吸光度值,并通过与加入样品前稀释液的吸光度进行对比进行计算。
3.6计算(红细胞指数)
红细胞指数(MCV、MCH和MCHC)通过RBC计数(RBC)、Hb浓度(HGB)和红细胞压积(HCT)的值计算出。计算公式如下:
MCV(fl)= HCT×1015 RBC/L MCH (pg)= HGB(g/L)×1012 RBC/L MCHC(g/L)= HGB(g/L) HCT 4 试剂
4.1 抗凝剂:150g/L的EDTA-K2
4.2 稀释液(CELLPACK)试剂品牌:Sysmex代码:PK-30L包装规格:20L 嗜碱细胞溶血素(STROMATOLYSER-FB)试剂品牌:Sysmex代码:FBA-200A?包装规格:5L 白细胞分类溶血素(STROMATOLYSER-4DL)试剂品牌:Sysmex代码:FFD-200A包装规格:5L白细胞分类染液(STROMATOLYSER-4DS)试剂品牌:Sysmex?代码:FFS-800A?包装规格:42ml×3袋血红蛋白溶血素(SULFOLYSER)试剂品牌:Sysmex代码:SLS-220A?包装规格:5L清洁剂(CELLCLEAN)
5 校准品与质控品
5.1 校准品:使用与仪器配套的校准品。
5.2 质控品:使用与仪器配套的质控品,有正常值与异常值两种浓度水平。
6 适用仪器
Sysmex XT-1800i型自动血液学分析仪
7 校准
7.1 将校准品连续测定11次,取2~11次的均值,与定值比较,计算相差百分数。
7.2 校准确认:各参数相差百分数在规定范围内,不需调整;超过范围,调整新系数。
7.3 仪器维修后要重新校准,平时每6个月应校准一次。
7.4 校准验证的方法:用校准品连续测定11次,取2~11次的均值,与定值比较,计算相差百分数,其值应在规定范围内。
8 分析操作步骤
开机自检 → 质控检测 → 输入工作表 → 加载标本 → 测定操作 → 结果审核 → 报告。
9 检验结果报告
9.1 结果的报告
9.1.1 结果经审核后,确认准确无误后发出报告。
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