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HIV-1中和抗体检测方法的建立
中国生物制品学杂志2008年9月第2l卷第9期ChinJBiologicals 2008,V01.2lNo.9
·810· September
R392-33文献标识码A 文章编号1004-5503(2008)09-0810-03
中国图书分类号R373.9 【实验技术】
HIV.1中和抗体检测方法的建立
赵东海-·:△张喜珍协马红霞1孔维1于湘晖1
【摘要】目的以荧光素酶作为报告基因,表达假病毒,建立快速、有效的HIV.1中和抗体检测方法。方法将HIV-1中
染293T细胞,培养48h后收获含有假病毒的上清液.感染表达CD4受体和一个辅助受体CCR5的HOS细胞,培养72h后,裂解
000和160
转染的293T细胞,均有HIV.1结构蛋白Gagpol和Env的表达,相对分子质量分别为55000,用产生的假病毒感染
为今后抗体样本及病毒样本的检测提供了参考。
【关键词】 人免疫缺陷病毒l型;中和抗体;荧光素酶;假病毒
for
ofAMethodDeterminationofHⅣ-1
Development NeutralizingAntibody
ZHAO Research
Xi—zhen,MA al(Vaccine Science,皿in
Dong-hai,ZHANGHong—xia,et Center,CollegeofLife
Univers如,,Changchun130021,China)
To lucifersse and a andeffectivemethodfor
【Abstract】 at;report rapid
Objectiveexpresspseudovimsusing gene develop
of cells witll
determinationHIV—l Transfeet293T
neutralizingantibody.Methods bypNL4-3.Luc.R—Etogethereukaryotieexpression
EnvB/CandVRl012EnvCandculturefor48h.The WaShar-
plasmidspoDNA3.1 respectively supernatantcontainingpseudovims
vestedtOinfectHOScells CIMand CCR5.Theinfectedcellswereculturedfor72
accessory h,then
expressingreceptor receptor
HIV-l relativemolecularmass
anddeterminedforlueiferasecontent.Resultsstructural andEnv。with of
lysed protei
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