光合细菌PSB-B的快速分离纯化.pdf

陕西农业科学 光合细菌PSB—B的快速分离纯化 周冰．张亚军。李贵琴，胡青平 (山西师范大学生命科学学院，山西临汾041004) 摘 要：用自制的简易光照培养箱从山西临汾汾河的表层污泥中分离得到一株光合细茵，命名为PSB-B。该 茵株生长速率非常快，厌氧培养物为红色，革兰氏染色呈阴性。通过形态学特征、生理生化特性和活细胞吸收 光谱等对其进行了初步鉴定，该菌株可能属红螺茵科红假单胞茵属。 关键词：光合细菌；快速；分离 光合细菌(Photosyntheticbacteria，PSB)是用无菌铲子直接取污泥50—100g，装入透明的玻 一类以光作为能源、能在厌氧光照或好氧黑暗条 璃圆桶标本缸内，再取上述汾河河水100ml，加 件下进行光合作用的细菌，是自然界中重要的微 入标本缸内，带回实验室。采样时记录地点、日 生物类群，根据《伯杰细菌鉴定手册》第八版，将光 期、水温、pH、是否有H。S等气味。 合细菌列为细菌门，真菌纲，红螺菌目，下分为红 1．1．2培养基酵母膏蛋白胨液体培养基‘4|：酵 螺菌亚目和绿菌亚目，有四个科：红螺菌科、着色 母膏3 3 g，蛋白胨3g，CaCl2 菌科、绿硫菌科和绿色丝状菌科[1]。由于其生理 3 000 g，蒸馏水1 ml，pH6．8。酵母膏蛋白胨半 类群的多样性，碳、氮代谢和光合作用的独特性而 固体培养基添加琼脂6g，固体培养基添加琼脂 受到人们的关注，多年来，PSB被作为研究光合 20 g。’ 作用及生物固氮作用机理等的重要材料[2]。 1．2仪器设备 近年来研究表明：光合细菌在养殖业、种植 TGL一16G台式离心机(上海安亭科学仪器 业、环境治理、新能源开发利用等应用领域具有十 厂)；YXQ—LS—SII全自动立式电压力蒸汽灭菌 分广阔的前景，具有净化水质、提高育苗成活率、 器(上海博迅实业有限公司医疗设备厂)；T6新世 提高土壤肥力、增强植物抗病力、减少水体污染、 纪型紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有 进行生物制氢等多种作用功效[3]。但目前能被广 限责任公司)。 泛应用的光合细菌少之甚少，因此，大力开发和利 1．3方法 用光合细菌菌种资源，对进一步扩大光合细菌的 1．3．1快速富集培养称取泥样20 g放于无菌 应用具有深远的意义。 250 m1锥形瓶中。加入酵母膏蛋白胨液体培养 本研究采用自制的简易光照培养箱快速分离 基200ml，与泥样振荡混匀，加盖橡皮塞，造成厌 纯化了一株光合细菌PSB-B，该菌是从山西临汾 氧环境。放到装有60W白炽灯的自制光照培养 汾河大桥下的表层污泥中分