研究补肾口服液中淫羊藿苷的含量测定.doc

研究补肾口服液中淫羊藿苷的含量测定 摘要： 本文对补肾口服液进行了质量研究，采用高效液相色谱法对其中淫羊藿进行的定量研究，规定淫羊藿苷含量的范围，并对其进行了方法学考察；补肾口服液中的淫羊藿苷含量较高，易于分离提取，检测方法简单可行，具有稳定、杂质不易产生干扰等优点。 关键词： 补肾口服液 淫羊藿苷 高效液相色谱法 补肾口服液是补肾壮阳的常用药，疗效确切，市场使用较广。其中包括人参、肉苁蓉、淫羊藿、熟地等中药，以淫羊藿为君药，来源于小檗科植物淫羊藿Epimedium brevicornum Maxim.舒叶淫羊藿Epimedium sagittatum Maxim，柔毛淫羊藿Epimedium pubescens Maxim，巫山淫羊藿Epimedium wushanense T.S.Ying或朝鲜淫羊藿Epimedium koreanum Nakai的干燥地上部分，具有补肾阳，强筋骨，祛风湿的功效，用于阳痿遗精，筋骨痿软，风湿痹痛，麻木拘挛；更年期高血压。 1 仪器与试药 1.1仪器：日本岛津SCL-10Avp系统控制器；SPD-10Avp检测器；LC-10ATvp泵。 1.2试药：淫羊藿苷对照品（中国药品生物制品检定所）；补肾口服液自制；乙腈为色谱纯，水为二次蒸馏水，其余试剂均为分析纯。 2 方法与结果 2.1色谱条件：日本岛津SCL-10Avp系统控制器；SPD-10Avp检测器；LC-10ATvp泵；ODS柱（4.6×150mm）；流动相：乙腈-水（25.5:74.5）；流速：1.0ml/min；柱温：室温；检测波长：270nm；柱压：108kgf；理论塔板数不低于1500。 2.2对照品溶液制备：精密称取淫羊藿苷对照品2.32mg，加甲醇制成每1ml含0.0928mg溶液，即得。 2.3供试品溶液制备：精密吸取补肾口服液10ml置分液漏斗中，用醋酸乙酯提取3次，每次20ml，合并醋酸乙酯液，水浴蒸干，加50％乙醇使溶解，置10ml 量瓶中定容，即得。 2.4阴性液溶液的制备：取不含淫羊藿的补肾口服液10ml，以与制备供试品溶液相同的方法制备阴性液溶液。 2.5线性关系考察：精密吸取淫羊藿苷对照品溶液（0.0928mg/ml）2.5,5.0,10.0,15.0，20.0μl,按上述色谱条件进行色谱分析。以色谱峰峰面积积分值为纵坐标，对照品进样量为横坐标，绘制标准曲线，计算回归方程得Y=19824X-28753，r=0.9997。结果表明，淫羊藿苷进样量在0.232μg-1.856μg之间具有良好的线形关系。 2.6精密度试验：精密吸取供试品溶液10μl，连续进样5次，按上述色谱条件进行色谱分析，RSD为2.3%。 2.7稳定性试验：精密吸取供试品溶液，于0，2，4，8小时各进样10μl，按上述色谱条件进行色谱分析，RSD为1.4%。 2.8重复性试验：以同一批号样品制备5个供试品溶液，分别精密吸取供试品溶液各进样10μl，按上述色谱条件进行色谱分析，RSD为2.3%。 2.9加样回收率试验：精密吸取已知淫羊藿苷含量的样品5ml，精密加入2.5ml淫羊藿苷对照品溶液（0.0984mg/ml），以与制备供试品溶液相同的方法制备加样回收供试品溶液，在与测定供试品溶液相同的条件下测定加样回收供试品溶液。平均回收率为100.3%，RSD为1.3%。 3.0 样品含量测定：分别精密吸取对照品溶液5μl，供试品溶液10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。用高效液相色谱仪测得的色谱峰面积，以外标一点法计算样品中淫羊藿甙的含量。 3 小结与讨论 补肾口服液处方二十味中药，本文对其进行的质量研究，参考2005版药典（一部），采用高效液相色谱法对方中淫羊藿进行了定量研究，规定了淫羊藿甙的含量范围，并对其进行了方法学考察。淫羊藿中的淫羊藿甙含量较高，易于分离提取，用高效液相色谱法测定含量，具有稳定、杂质不易产生干扰等优点，所以用淫羊藿甙作为定量标准。