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[医药卫生]霍乱弧菌实验室检验技术
霍乱实验室检测技术 淄博市疾病预防控制中心 卫生检验中心 李玲 内容 一、霍乱概述 二、霍乱病原学 三、霍乱弧菌常规检验 四、霍乱弧菌的快速诊断 五、霍乱弧菌的噬菌体-生物分型 六、霍乱菌株的管理、保存与上送 一、霍乱概述 霍乱是由01群和0139群霍乱弧菌(V.cholerae)引起的急性肠道传染病,发病急、传播速度快、波及范围广、危害严重的甲类传染病。 是国内交通检疫传染病之一。 也是当今三种国际检疫传染病中最严重的一种。 霍乱病原菌发现 1883年德国科学家Koch发现霍乱弧菌 1905年埃及埃儿托检疫站首次分离到ElTor弧菌,与霍乱弧菌甚为相似,但经过多年的观察并不致病或仅引起轻度腹泻,直到1937-1958年发生4次爆发后才逐渐认识到ElTor弧菌致病性 1992年10月印度马德拉斯发现了新菌型O139霍乱弧菌 二、霍乱病原学 霍乱的病原学分类 霍乱的病原学特征 霍乱弧菌抗原结构及分类 抗原结构 霍乱弧菌有耐热的菌体(O)抗原和不耐热的鞭毛(H)抗原。H抗原为霍乱弧菌属所共有;O抗原有群特异性和型特异性两种抗原,是霍乱弧菌分群和分型的基础。 WHO腹泻控制中心将霍乱弧菌分为三群。 01群霍乱弧菌:包括古典生物型霍乱弧菌(vibrio cholerde)和埃尔托生物型(vibrio cholerde EL-Tor biotype)。 01群的特异抗原有A、B、C三种,其中A抗原为01群所共有,A抗原与其他B与C抗原结合则可分为三型,即:原型——AC(稻叶,Inaba)、异型——AB(小川,Ogawa)和中间型——ABC(彦岛,Hikojima)。 非01群霍乱弧菌:本群弧菌鞭毛抗原与01群相同,而菌体(0)抗原则不同,不被01群霍乱弧菌多价血清所凝集,依O抗原之异,本群可分为137个血清型。以往认为本群仅引起散发的胃肠炎性腹泻,一般此类弧菌感染不作霍乱处理,但1992年在印度及孟加拉等地发生霍乱暴发流行,后证实流行菌不被01群和137个非01群霍乱弧菌诊断血清所凝集。乃定为0139霍乱弧菌,并认定为真正的霍乱弧菌。 不典型01群霍乱弧菌:可被多价01群血清所凝集,但该群菌不产生肠毒素,因此无此病性 霍乱病原体分类 古典生物型 小川型 O1群 稻叶型 埃尔托生物型 颜岛型 霍乱弧菌 霍乱病原菌 O139群(Bengal) 非O1群 O2-O200群 腹泻病原菌 O1群和O139群抗原构造与血清分型 霍乱病原学特点 形态与染色 弧状或逗点状 革兰染色阴性 有一根单鞭毛,细菌运动非常活泼,呈鱼群穿梭样或流星状 革兰染色 电镜负染色—鞭毛 O139群和O1群霍乱弧菌特性对比 近年来,O139群霍乱弧菌已成为霍乱流行的主要病原。通过研究证明,O139群霍乱弧菌可能是O1群EItor 生物型的变异株。 (1)抗原构造 (2)分泌肠毒素 (3)耐药性 (4)临床特点 抗原构造 O139群霍乱弧菌不被已知的O1-O138群霍乱弧菌诊断血清所汇集。表明本菌的抗原性与O1群和其它非O1群霍乱弧菌有明显区别。 革兰氏阴性菌的抗原性都是由细胞壁的脂多糖(LPS)所决定。通过对O139群霍乱弧菌的LPS进行化学分析和血清学分析后发现O139群霍乱弧菌缺少O1群霍乱弧菌LPS中的特异性成分。 通过两者进行提取其LPS然后进行被动溶血试验与被动溶血抑制试验检测,结果显示两者抗原性有显著不同。O139群霍乱弧菌有荚膜而O1群霍乱弧菌无荚膜。 两者不同点: O139群所致病中有44.3%可发生腹部痉挛,也有引起严重粘液性腹泻的,进入外周血液可引起发热,出现菌血症或败血症。印度出现20例病人中有17例发热、白细胞增多。而O1群引起的病人未曾见过。 鉴别两者,必须通过血清学诊断来区分。 O22群与O139群血清有交叉汇集反应,必须用O22群弧
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