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犬是人类最早驯化的动物之一 驯化时间大约在1.4万年以前。 今天,犬仍以其非凡的功能,在军事、警务、护卫、牧畜、狩猎、导盲、伴侣等方面发挥着卓越的作用。 犬的繁育是一项很复杂的过程 包括大量选育亲本犬,强化或弱化某些特征,或者使其发生形态、生理和行为的变化。许多经过长期选育的犬,出于配对选择的目的,已经具有了各种不同的体型、大小、颜色和行为特征。现今世界上可以确认并正在被人类使用的犬品种大约有400个。 纯种繁育 犬的繁殖技术 犬的繁殖技术的研究起始于18世纪,1780年意大利生物学家Spallanzani首次进行犬人工授精(AI)试验取得了成功,这开创了动物繁殖技术研究的先河。 犬的现代繁殖育种技术可分为: (1)犬的发情调控技术; (2)人工授精技术; (3)胚胎体外培养和移植技术; (4)体外受精技术; (5)克隆技术; (6)转基因动物育种技术等。 笔者曾试过,孕妈血清促性腺激素(PMSG),和人绒毛膜促性腺激素(HCG),以及促黄体生成素(LH);有一定效果。 但受孕率不高以及后遗症问题值得考虑。 目前我国生猪普遍推行人工授精技术。 猪的人工授精在世界各地已经得到了广泛使用。 目前,世界上每年大约有2500万头次猪进行人工授精。其中,超过99%的人工授精使用的是储存在15℃~20℃下,最多保存3天的液态冷藏精液。 蓝狐的人工授精技术在蓝狐养殖业中得到了很好的推广,人工授精技术可以提高优良种公狐的配种能力,公狐自然交配时最多交配3-5头,采用人工授精技术,1头公狐的精液可以输入给50-100头母狐,而且受精率得到了很大的提高。人工授精技术抓住授精期和授精技术这两个环节是提高蓝狐繁殖的有利保证。 曾红极一时的波尔山羊胚胎移植 犬的体外受精 基于上述困难,目前犬的体外受精研究仍在探索中。 南农大成功克隆4只转基因奶山羊 2011年4月8日、13日、14日凌晨,位于山东曹县的南京农业大学克隆羊基地传来喜讯4只带有人乳铁蛋白基因的克隆羊先后顺利降生。目前这4个小家伙各项体征正常。这标志着南农大动物胚胎工程技术团队承担的国家“高产优质转基因奶羊新品种培育”项目子任务,历时两年终获成功。这是我国生物新品种培育重大专项研究的一个重要突破。 4个小家伙的“亲本”是西北农大的一头萨能奶山羊。去年他们从这头纯种母羊耳朵上取了指甲盖大小的一块皮肤组织。从这小块组织中提取的耳皮肤成纤维细胞,就是克隆羊的基因来源,即供体细胞。通过对供体细胞处理,培育出转基因克隆胚胎,最后借用“代孕母羊”生出后代。“因此,代孕母羊虽然经过5个月怀胎、最终生产出克隆小羊,但它们之间并不存在遗传关系。小羊们反而都跟‘亲本’一样,长着一对高高上翘的大耳朵。” 江苏省农科院成功克隆6只转基因奶山羊 2011年12年14日,从省农科院畜牧研究所获悉,该所动物遗传资源与草食家畜育种项目组成功克隆出6只转基因奶山羊(如图 资料图片),其中两只携带人乳白蛋白基因。 据介绍,这6只克隆奶山羊的诞生经历了基因克隆、载体构建、细胞转染、体细胞核移植及胚胎移植等一系列复杂程序,目前生长状况良好。现在又有几十只母羊怀孕了,待5个月孕期满后,明年春天,将诞生第二批克隆奶山羊。不过,这几十只怀孕母羊生出的小羊不一定都是能成功表现克隆基因的克隆羊,要检测才能确定。即使是克隆羊,也不一定都能成功表现出人乳白蛋白基因。 南京农业大学徒手技术克隆猪获得成功 2012年9月15日,一胎8头体细胞克隆小猪诞生,这是南京农业大学首例利用徒手克隆核移植技术生产的克隆猪,这标志着该校利用徒手克隆技术生产克隆猪取得重大突破。 徒手克隆技术指利用一般的显微镜,手工把卵切成两半、去核,然后再将不带核的卵重新组合。徒手克隆技术简便易学,成本低,效率高,无需昂贵仪器设备,正逐渐成为生产转基因克隆猪、牛、羊等动物的主流技术。 逆转录病毒法:就是将外源基因替换病毒基因组的反式元件,通过顺式元件的调控序列和感染成分重组病毒载体,然后注射到MII期的卵母细胞,体外受精和筛选。即将目的基因重组到逆转录病毒载体上,然后人为感染着床前或着床后的胚胎,也可以直接将胚胎与能释放逆转录病毒的单层培养细胞共孵育以达到感染的目的,通过病毒将外源目的基因整合到宿主基因组DNA中去。 逆转录病毒法是最早用于生产转基因动物的方法,但是由于细胞转染过程中不能准确控制外源基因的整合时间,得到的转基因动物大都为嵌合体,所以此项技术并未获得更为深入的发展。 通过显微操作仪把获得的外源基因片段注入到动物受精卵中,随后,外源基因片段随机整合到动物受精卵染色体上,通过受精

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