细胞毒类抗肿瘤药物非临床研究.doc

附件四 细胞毒类抗肿瘤药物非临床研究 技术指导原则 细胞毒类抗肿瘤药物非临床研究技术指导原则 一、细胞毒类抗肿瘤药物是指能够直接肿瘤细胞抑制肿瘤细胞生长增殖的一类化疗药物，作用机制包括抑制肿瘤细胞核酸或蛋白质的合成、干扰微管系统、抑制拓扑异构酶等。 细胞毒类抗肿瘤药物是目前治疗恶性肿瘤的主要手段之一。此类药物在杀灭或抑制肿瘤细胞的同时，也会对机体的正常细胞（尤其是代谢旺盛的细胞）产生影响，通常在药效剂量下就会导致病人出现不良反应。类药的特点决定了其非临床研究具有的特殊性。 本指导原则仅代表目前对细胞毒类抗肿瘤药物非临床研究的一般性认识，旨在为细胞毒类抗肿瘤药物的非临床研究提供技术参考具体药物的非临床研究应在本指导原则的基础上，根据药物的自身特点制订研究方案。本指导原则主要适用于细胞毒类抗肿瘤化学药物重点阐述细胞毒类抗肿瘤药物非临床研究的特殊性，凡与既往颁布指导原则内容重复的部分，文中不再赘述，请参照有关指导原则执行。 二、 细胞毒类抗肿瘤药物有效性研究的目的主要探索受试物的作用机制、作用强度等，为安全性评价以及临床试验中给药方案、的选择提参考信息。由于的局限性，目前有效性研究准确地预测的疗效。注册申请人应充分意识到细胞毒类抗肿瘤药物有效性研究的不确定性，在有效性中模型尽可能临床病人的实际情况，以降低开发风险。（一）体外试验主要用于筛选候选化合物，初步了解受试物的作用机制、敏感和作用强度，为随后进行的体内试验提供参考。作用机制（如药物靶点、细胞周期特异性等）对于非临床和临床试验的设计具有重要，应伴随开发程不断深入。对于创新性药物，必要的作用机制研究资料应在申请临床时提交。在体外培养的不同人肿瘤细胞系中加入不同浓度的物，采用磺酰罗丹明染色法（SRB法）、四氮唑盐还原法、（IC50），并与进行比较，初步预测物的作用强度和。应根据物的结构特点和作用确定体外试验采用的研究方法。例如，以线粒体为作用靶点的不宜采用四氮唑盐还原法。 在选择肿瘤细胞系时应考虑到细胞的生长和增殖速率一般应至少选用1种人癌。与细胞共培养的时间一般为48~72 小时，贴壁细胞需先贴壁24 小时后再给药。试验应设阳性阴性对照组，阳性对照为抗肿瘤药，阴性对照为溶媒对照。试验至少应重复一次。 （二） 体内试验用于受试物对特定类型肿瘤细胞的杀伤或抑制作用，探索受试物产生药效作用的给药剂量、途径、频率周期等。 体内试验通常采用动物肿瘤移植模型和人癌异体移植模型。由于动物肿瘤移植模型与临床疗效之间的相关性不强，仅可用于化合物的初步筛选。通常情况下，以人癌异体移植模型试验结果评价细胞毒类抗肿瘤药物有效性。1、人癌异体移植模型试验通常在无胸腺鼠或联合免疫缺陷小鼠体内移植人癌细胞系，观察对肿瘤生长的抑制作用。移植肿瘤的选择主要体外试验结果、细胞系的生物学特点。原则上，应尽量选用多种人癌移植瘤模型；移植的人癌细胞系在组织学等方面与肿瘤尽量接近。 体内试验一般至少应选用种人癌移植瘤模型移植瘤后应传2~3代后再用于体内抗肿瘤试验为了保持移植瘤的生物学特性和遗传特性，移植瘤体内传代应少于15~20代。 2、 。肿瘤移植部位主要在皮下，也包括原位和腹腔等。待移植肿瘤生长至100mm3后将动物随机分组一般包括高、中、低3个剂量的组、阳性对照组和阴性对照组。组受试物剂量的选择应体现出量效关系，高剂量不宜超过受试物的最大耐受量。应根据受试物的药动学特点和毒性反应等确定给药频率和周期；给药途径尽量与推荐临床用药的途径相同。阳性对照药一般满足以下条件：（1）与受试物作用机制相同或相近；（2）；（3）临床广泛应用且疗效确切。阳性对照药的给药方案应体现出最佳治疗作用，其剂量一般不宜超过最大耐受量。阴性对照组给予相应的溶剂。 3、 推荐使用测量瘤径的方法，动态观察受试物的抗肿瘤效应。肿瘤直径的测量次数根据移植瘤的生长情况而定，一般为每周2~3次。在试验中还应观测与药物安全性有关的指标，如动物体重增长和死亡率，将治疗组的数据与对照组进行比较，对于判断物的安全性和开发前景具有重要意义。试验中应记录检测指标的变化与给药时间的关系，以便了解物的作用特点，减少单次记录试验结果可能引起的误差。体内抗肿瘤试验结果