原创：野葛叶蛋白质提取工艺研究.doc

　　摘要：以野葛叶为原料，采用水提醇沉法，通过单因素试验和正交试验，以凯氏定氮法测得野葛叶蛋白质含量和提取率，对提取温度、提取时间、溶液ｐＨ值、液料比４个因素进行优化研究，确定野葛叶蛋白质提取的最佳方法。结果表明，从野葛叶中提取蛋白质的最佳工艺条件为：提取温度９０ ℃，提取时间１２０ ｍｉｎ，提取溶液的ｐＨ值６，液料比１．４∶１（Ｖ／Ｗ，Ｌ∶ｋｇ）。 中国论文网 　　关键词：野葛叶；蛋白质；提取 　　中图分类号：Ｓ５６７．９；Ｒ２８４．２文献标识码：Ａ文章编号：0439－８114（２０11）11－2298-03 　　 　　Ｓｔｕｄｙ ｏｎ Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ Ｐｒｏｃｅｓｓ ｏｆ Ｌｅａｆ Ｐｒｏｔｅｉｎ ｆｒｏｍ Ｐｕｅｒａｒｉａ ｌｏｂａｔａ（Ｗｉｌｌｄ．）Ｏｈｗｉ 　　 　　ＨＥ Ｍｅｉ－ｊｕｎ１，ＬＩＡＯ Ｃｈａｏ－ｌｉｎ１，ＷＡＮＧ Ｈｕａ１，ＺＨＡＮＧ Ｙｕ１，ＭＵ Ｓｅｎ１，ＧＵＯ Ｈａｎ－ｊｉｕ１，ＨＥ Ｙｉｎ－ｓｈｅｎｇ１， 　　ＺＨＡＯ Ｒｅｎ－ｊｕｎ１，ＨＵＡＮＧ Ｄｏｎｇ－ｈａｉ２，ＬＩＡＯ Ｌｕ－ｊｉｎｇ１ 　　（１． Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｈｅｒｂａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅｓ， Ｈｕｂｅｉ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ， Ｅｎｓｈｉ ４４５０００， Ｈｕｂｅｉ， Ｃｈｉｎａ； 　　２． Ｈｕｂｅｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｆｏｒ Ｎａｔｉｏｎａｌｉｔｉｅｓ， Ｅｎｓｈｉ ４４５０００， Ｈｕｂｅｉ， Ｃｈｉｎａ） 　　 　　Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｅｔｈａｎｏｌ ｓｕｂｓｉｄｉｎｇ ｍｅｔｈｏｄ ｗａｓ ａｄｏｐｔｅｄ ｔｏ ｅｘｔｒａｃｔ ｐｒｏｔｅｉｎ ｆｒｏｍ Ｐｕｅｒａｒｉａ ｌｏｂａｔａ ｌｅａｖｅｓ． Ｓｉｎｇｌｅ ｆａｃｔｏｒ ａｎｄ ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｔｅｓｔ ｃｏｍｂｉｎｅｄ ｗｉｔｈ Ｋｊｅｌｄａｈｌ ｍｅｔｈｏｄ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ｏｐｔｉｍｉｚｅ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ， ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｉｍｅ，ｓｏｌｕｔｉｏｎ ｐＨ， ａｎｄ ｌｉｑｕｉｄ ｔｏ ｓｏｌｉｄ ｒａｔｉｏ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｕｍ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｏｆ ｐｒｏｔｅｉｎ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｆｒｏｍ ｌｅａｖｅｓof Ｐｕｅｒａｒｉａ ｌｏｂａｔａ ｗｅｒｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ， ９０ ℃； ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｉｍｅ， １２０ ｍｉｎ； ｓｏｌｕｔｉｏｎ ｐＨ， ６； ａｎｄ ｌｉｑｕｉｄ to ｓｏｌｉｄ ｒａｔｉｏ， 　　１．４∶１（Ｖ／Ｗ，Ｌ：ｋｇ）． 　　Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ｌｅａｖｅｓ ｏｆ Ｐｕｅｒａｒｉａ ｌｏｂａｔａ（Ｗｉｌｌｄ．）Ｏｈｗｉ； ｐｒｏｔｅｉｎ； ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ 　　 　　野葛［Ｐｕｅｒａｒｉａ ｌｏｂａｔａ（Ｗｉｌｌｄ．）Ｏｈｗｉ］为豆科葛属植物，具有良好的药用价值及食用价值，被卫生部列为药食两用植物。野葛根富含淀粉及异黄酮类物质［１］，其中淀粉可食用性在我国及日本、韩国等周边国家均具有悠久的历史；异黄酮类物质具有降血压、降血脂、降血糖、扩张冠状动脉、防癌抗癌以及抗氧化等作用。目前，野葛的研究多集中在野葛根的药理药效和有效成分提取等方面［２－４］。而王淑惠等［５］对葛属植物叶的挥发性成分也进行了分析。目前对野葛叶蛋白质提取分离工艺尚未见报道。 　　因此，本研究主要是对野葛叶蛋白质提取工艺进行研究，旨在提高野葛的资源利用率，延伸野葛加工企业产业链。 　　１材料与方法 　　１．１材料 　　１．１．１野葛叶试验用野葛叶均采自华中药用植物园。 　　１．１．２试剂氢氧化钠、盐酸、硫酸等均为分析纯。 　　１．１．３仪器旋转蒸发器，ＲＥ－５２，上海亚荣生化仪器厂；凯式定氮仪，ＫＤＹ－９８３０，北京华威兴业科技有限公司；恒温水浴锅，ＨＨ－Ｓ，上海索谱仪器有限公司；精密ｐＨ计，ＰＨＳ－２５Ｂ型，上海大普仪器有限公司；低速离心机，ＴＧ１６－ＷＳ，湘仪离心机仪器有限公司。 　　１．２方法 　　１．２．１单因素试验①以１ ｋｇ鲜野葛叶为原料，以１ ５００ ｍＬ水为提取液，提取时间为１００ ｍｉｎ，分别以５０、６０、７０、８０、９０、１００℃提取野葛叶蛋白质；②以１ｋｇ鲜野葛叶为原料，以１ ５００ ｍＬ水为提取液，７０℃为提取温度，分别提取野葛叶蛋白质６０、８０、１００、１２０、１４０、１６０ ｍｉｎ；③以１ ｋｇ鲜野葛叶为原料，以 　　１ ５００ ｍＬ水为提取液，７０℃为提取温度，提取时间为１００ ｍｉ