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临床微生物检验 一、血液检验 正常人血液是无菌的,目前败血症一词不用,常用菌血症和脓毒症,脓毒症是指全身性炎症反应。菌血症是指细菌侵入血循环,在血液中可检测到细菌,包括一过性和持续性,有明显感染症状。血液感染是一种危重的全身感染,提供病原学的诊断极为重要。 1.常见病原菌 2.血液标本的病原菌的检验 3.病原菌的检验程序 4.临床意义 1.葡萄球菌菌血症 由耐甲氧西林金黄色萄球菌(MRSA)及凝固酶阴性葡萄球菌引起 的逐年增多,占10%~15%。 2.肠球菌菌血症 约占10%,常见泌尿生殖道、消化道和腹腔感染的病人。 3.G-杆菌菌血症 主要侵犯免疫功能低下的病人。 4. L型菌感染菌血症 使用抑制细胞壁的抗生素,由缺损细胞壁的细菌感染所致。 5.厌氧菌菌血症 常合并需氧菌感染,症状重而复杂。 6.真菌血症 常由条件致病性真菌引起,有念珠菌、曲霉和毛霉等。 7.医院感染菌血症 近年来明显增多,占30%—60%。 二、中枢神经系统感染 1.常见病原体 G+菌 葡萄球菌,肺炎链球菌, B群、A群链球 菌,消化链球菌,结核分枝杆菌,产单核细胞李斯特菌、炭疽芽胞杆菌; G-菌 脑膜炎奈瑟菌,大肠埃希菌,铜绿假单胞菌,卡他布兰汉菌,类杆菌,不动杆菌,肺炎克雷白杆菌; 病毒 乙型脑炎病毒,柯萨奇病毒A B,脊髓灰质炎病毒,新肠道病毒68~71,狂犬病毒; 真菌及其他 新生隐球菌,白假丝酵母菌,钩端螺旋体 2.微生物检验程序 对婴幼儿不能腰穿时,用PCR技术检测外周血,对脑膜炎条瑟菌感染者的阳性率为100%,且不受抗生素药物治疗的影响;涂片和结核分枝杆菌培养阳性率有限,且时间长,用 PCR技术检测脑脊液中结核分枝杆菌DNA,检出率高,快速灵敏和特异,但要严格操作规程,避免假阳性。 3.抗体检测 为病毒检测的快速诊断方法,较常用。 (1)中和试验:主要检测中和抗体lgG,此抗 体持续时间长有诊断意义,阳性率和特异性均高。双份血清效价4倍增高。 (2)特异性IgM抗体测定:此抗体在病后4天即可出现,2周可达高峰,常用于早期诊断。用 ELISA、间接免疫荧光法等检测,敏感性和特异性较高。 (3)补体结合试验:补体结合抗体为lgG抗体,常在病后第二周出现,5—6周达高峰,单份血清1:4为阳性,双份血清效价增高4倍为阳性,用于回顾 性诊断或流行病学调查。 (4)血凝抑制试验:可用于临床诊断及流行病学调查。血凝抑制抗体在病后5天出现, 2周时达高峰,双份血清抗体效价增高4倍以上有诊断价值,阳性率高于补体结合试验,但可出现假阳性。 4.临床意义 1.细菌性脑膜炎是常见类型,其中以流行性脑脊髓膜炎为常见,结核性脑膜炎呈回升趋势,为防治重点。肺炎球菌、链球菌脑膜炎仍常见,流感嗜血杆菌脑膜炎以及其他G-杆菌性脑膜炎有增多趋势。 3.流行性乙型脑炎是人兽共患的自然疫源性疾病。 4.肠道病毒对中枢神经系统的危害性已逐渐引起人们的关注和重视。还不断发现新肠道病毒68-71型引起的脑膜炎及脑炎。 三、 创伤和外科感染1.常见病原菌 2.微生物检验程序 见第一节血液感染或有关章节。取创伤分泌物和脓液作标本;放线菌首先要检出标本中的硫磺颗粒;检测结核分枝杆菌作抗酸染色镜检;检测厌氧菌要作厌氧培养。由创伤、手术、侵人性器械操作等外科治疗引起的感染最为常见,并日渐增多。 四、上呼吸道感染 (一)常见病原体 1.革兰阳性 金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、化脓 链球菌、肺炎链球菌、结核分枝杆菌、白喉棒 状杆菌、厌氧菌、炭疽芽胞杆菌、白假丝酵母 菌、放线菌、奋森螺旋体; 2.革兰阴性 脑膜炎奈瑟菌、大肠埃希菌、肺炎克雷白杆菌、 铜绿假单胞菌、流感嗜血杆菌、肠杆菌、不动 杆菌、百日咳杆菌、军团菌、肺炎支原体 (二)细菌学检验程序 1. 细菌学检验见第一节血液感染及有关章节。 2. 病原体检测只对某些疾病诊断具有意义。由于菌群复杂,正常寄生菌和种类繁多,一份咽拭子分离出来的细菌不一定与疾病有关,另外由于接受药物治疗,使某些细菌受到抑制,可影响阳性检出率。因此,在分析结果时应紧密结合临床。 3. 鼻咽拭子标本的检测有助于猩红热、风湿热、急性肾小球肾炎病人的临床诊断;还可检出化脓链球菌、奋森螺旋体、脑膜炎奈瑟菌、麻风杆菌等以协助诊断;对白喉、百日咳或口腔念珠菌感染的诊断有意义,应结合临床。 五、 下呼吸道感染 (一)常见病原体 1.革兰阳性 金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、肺炎链球菌、A群链球菌、肠球菌、结核分枝杆菌、白喉棒状杆菌、炭疽芽
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