一种虫草抗肿瘤细胞毒活性及其作用机制的研究（省卫生厅优秀医学科技人才专项基金）.doc

卫生厅 优秀医学青年科技人才专项科研基金 申 请 书 申请者 专业领域 基础医学 工作单位 详细地址 邮政编码 联系电话 填报日期 2004年9月19日 一、简表 拟研究的课题名称 一种虫草抗肿瘤细胞毒活性及其作用机制的研究 申请金额 0.8万元 起止年月 2004年7月至2005年12月 申请者 姓名 性别 男 出生年月 民族 汉 年参加研究月数 5 职称 职务 留学国别 留学时间 共 月 留学学位 单位名称 单位地址 邮编 电话 二、本人简历 学习简历： 科研简历： 三、目前正在进行的各类科研项目 项目名称 起止年月 负责或参加 课题来源 四、近三年已发表的主要论文、著作目录 论文、著作名称 类别 出版年月 出版社或期刊 名称及卷期 独著或合著 五、近三年来，国内外对本人论文、著作引用情况及学术方面的评价意见（须附复印件） 五、近三年来获得科技奖励情况，说明本人在所获得奖励中的名次和作用，并付证书的复印件 七、获资助后拟开展的主要研究内容设想和实施方案 （一）主要研究内容 戴氏虫草是一种濒临枯竭的药用虫草资源，我们利用现代生物技术，初步解决了其液体培养的技术难题，为其进一步应用价值评估奠定了基础。在本项目中，拟重点围绕其抗肿瘤活性，就细胞毒作用及其作用机制开展深入研究。具体内容如下： 1、通过人口腔表皮癌KB、小鼠白血病L1210和P388等体外细胞模型，评价虫草代谢产物的细胞毒作用； 2、对肿瘤细胞增殖动力学的影响 3、诱导肿瘤细胞凋亡的研究 （二）实施方案 研究方法 1、体外细胞毒实验：采用四氮唑盐酶还原法测定抗肿瘤的生物效应通过流式细胞术（FCM）DNA含量分析，检测草木王对瘤株的影响细胞调亡通过荧光显微镜观察、DNA片断琼脂糖凝胶电泳和TUNEL法等检测不同剂量草木王对肿瘤细胞凋亡的影响； 4、化学分离实验：采用不同极性的溶剂提取，获得不同有效提取部位，并用体外细胞模型评价。 技术路线 草木王发酵产物 有效提取部位 体外药理实验 细胞周期影响 细胞凋亡影响 评价细胞毒作用 可行性分析 本项目是对原有工作基础的继承和发展；项目研究内容和目标明确，方法和技术路线科学合理，有较强操作性；项目组成员有学科交叉优势；项目承担单位省细胞工程重点实验室有较强技术支撑，且在编职工为专职研究人员或技术人员，有充分的工作时间保证。本项目一旦获得资助，我们有能力，也有条件确保其顺利实施。 八、目前已具备的研究条件及合作情况 本对本室的硬件设备投入已达千万余元，基本能满足项目实施的硬件要求涉及到本项目的主要设备列出如下：、生物荧光倒置显微镜（数码显微摄影）（Leica DMIRB, Germany） 1台； 、台式高速冷冻离心机（15804R,Eppendorf,Germany） 1台； 、流式细胞仪（FACS Calibur, B-D, USA）1台；、全波长荧光酶标仪（TECAN Safire, Austria） 1台； 、荧光定量PCR系统（LightCyclerTM, Switzerland） 1台； 、多功能梯度PCR仪（Eppendorf , Germany） 1台； 、电泳系统包括：垂直电泳槽；水平电泳槽；印迹转移；电转移；电泳电源（Bio-Rad,USA）2套； 、全自动数码成像及分析系统（GenGenius, Syngene, USA） 1台； 、超纯水制备系统：纯水制备系统（Millipore USA）；超纯水制备系统（Elga,UK） 1套；、超声细胞破碎仪（MSE,UK） 1台； 1、液氮罐（120L, ICI, USA） 3台； 12、超低温冰箱（-40℃, SANYO, Japan） 1台； 1、超低温冰箱（-80℃,Heto, Demark） 1台；、二氧化碳培养箱（3141s, IR, forma, USA） 3台； 、全温度旋转振荡仪（QHZ-98