工业发酵分析实验2013.doc

工业发酵分析实验报告 姓名：莫丹 学号：20102500089 指导老师：江学文 尹亮 课程名称：工业发酵分析实验 完成时间：2013年4月 所属单位：华南师范大学生物科学学院 实验一 发酵酱油中氨基酸态氮的测定 一、教学目标或要求： 1、2、36%～38%） c（NaOH） ＝ 0.05mol/L氢氧化钠标准滴定溶液：称取2.0gNaOH，用水溶解并稀释至1000ml，标定参见3.1.5节的⑩ 四、操作方法 1、酸度计（pH计）校正 用蒸馏水清洗电极 →滤纸揩干 →插入pH=6.86的标准溶液中 →调节斜率 至最大→待读数稳定 →调“定位”键 →再清洗电极 →滤纸揩干 →插入pH=9.18的标准溶液中 →“定位”键不动 →待读数稳定 →调“斜率”键，使读数为该溶液当时的pH值。 2、测定 吸取5.0ml试样，置于100ml容量瓶中，加水至刻度，均匀后吸取20.0ml，置于200ml烧杯中，加60ml水，开动磁力搅拌器，用氢氧化钠标准溶液[c（NaOH）= 0.050mol/L]滴定至酸度计指示pH8.2，记下消耗的氢氧化钠标准溶液的毫升数，可计算总酸含量。 加入10.0ml甲醛溶液，混匀。再用氢氧化钠标准溶液（0.050mol/L）继续滴定至酸度计指示pH9.2，记下消耗的氢氧化钠标准溶液的毫升数。 同时量取80ml水，先用相同氢氧化钠标准溶液（0.050mol/L）调至pH8.2，再加入10.0ml甲醛溶液，再用氢氧化钠标准溶液（0.050mol/L）继续滴定至酸度计指示pH9.2，记下消耗的氢氧化钠标准溶液的毫升数，同时做试剂空白试验。 【结果计算】 （V1–V2）×C×0.014 氨基酸态氮（g/100ml） ＝ ──────────── × 100 5×V3/100 式中： V1: 试样稀释液加入甲醛后消耗氢氧化钠标准溶液滴定的体积，（ml）； V2：试剂空白加入甲醛后消耗氢氧化钠标准溶液滴定的体积，（ml）； V3：试样稀释液取用量，（ml）； C：氢氧化钠标准溶液的浓度，（mol/L）； 0.014：与1.0ml氢氧化钠标准溶液（C =1.0mol/L）相当的氮质量，（g）。 五、思考题： 1. 试说明酱油氨基酸态氮测定采用甲醛滴定法的原理和基础。 原理：因氨基酸是具有氨基和羧基的两性化合物，不能直接用酸碱中和进行测定，采用加入甲醛掩蔽氨基的碱性，呈现羧基的酸性，然后用NaOH滴定。 基础：甲醛法又分为指示剂滴定法和电位滴定法，滴定终点加甲醛后确定在pH9.2是因为氨基酸溶液中存在1mol/L甲醛时，终点从pH12左右移至pH9附近，亦即酚酞指示剂的变色区域，这为甲醛滴定法的基础。 氨基酸能否直接用酸或碱滴定？为什么？ 氨基酸是一种两性电解质，不能直接用酸或碱滴定，因为其等电点的pH值过高，单一指示剂很难满足要求。 氨基酸态氮更为精确的测定方法是哪种？ 范斯莱克定氮法 实验二 发酵酱油中还原糖的测定 一、教学目标或要求： 1、掌握廉–爱农法（费林试剂法）测定发酵成熟醪中还原糖的原理和基础； 2、掌握费林试剂滴定的操作方法。 二、原理 氧化剂：Fehling试剂 甲液：硫酸铜溶液 乙液：氢氧化钠与酒石酸钾钠 混合时：2NaOH + CuSO4 = Cu(OH)2 + Na2SO4 指示剂：四（次）甲基蓝 氧化态 蓝色 还原态 无色 三、仪器与试剂 电炉、糖液滴定管、150ml锥形瓶 1．费林氏甲液：称取分析纯硫酸铜（CuSO4·5H2O）15g及四甲基蓝 （次甲基蓝）0.05g，用蒸馏水溶解，定容至1000ml。 2．费林氏乙液：称取分析纯酒石酸钾钠50g，分析纯氢氧化钠54g及分析纯亚铁氰化钾4g，用蒸馏水溶解，定容至1000ml。 3．0.1%葡萄糖标准溶液：精确称取在105℃烘 2～3h至恒重的分析纯无水葡萄糖1000g，放入100mL烧杯中，用蒸馏水溶解，定容至1000ml，为防染菌，可加 5mL浓盐酸后再定容。 四、分析步骤 1．样品处理及吸取 精确吸取样品10m