10实验十_果蝇唾腺染色体【PPT】.ppt

一、实验目的 了解果蝇唾液腺染色体的形态学及遗传学特征； 学习分离果蝇幼虫唾液腺的技术 ； 掌握唾液腺染色体制片方法。 三、实验原理 果蝇唾腺染色体特点： 巨大性和伸展性，多线性，具有横纹，体联会，染色中心。 正常：间期DNA复制 两条染色单体 着丝点裂开 子染色体 核分裂 胞质分裂 果蝇：有丝分裂停止在分裂间期，DNA不断自我复制，着丝点不裂开 同源染色体紧密配对：体细胞联会，所以染色体只呈现单倍数； 染色中心：从染色体中心处伸出5条长臂，1条极短臂； 染色后，出现一系列宽窄不同、染色深浅不一的横纹； 四、实验用具药品 1．仪器用具：显微镜、双目解剖镜、恒温培养箱、培养瓶、载玻片、盖玻片、镊子、解剖针、吸水纸、酒精灯、火柴等。 2．药品试剂：无水酒精、冰醋酸、 石炭酸品红、生理盐水、1N盐酸、 蒸馏水。 3．培养基：玉米琼脂培养基。 1、选取幼虫 取三龄幼虫，置于载玻片上，并滴加一滴生理盐水，观察幼虫结构：具一钝尾和带黑色口器的尖头端。 2、腺体剖取 3、腺体解离 剥离脂肪体及其他杂物，分离出纯净的唾腺 ，用吸水纸小心吸去生理盐水。 加1滴1N HCl，浸2—3分钟，使组织疏松，以便压片时细胞分散，染色体散开。 4、染色 用吸水纸吸去盐酸，加1滴蒸馏水轻轻冲洗后吸干，重复3～4次，洗净残留的盐酸。 加2滴石炭酸品红染液，染色10—20分钟（此过程应保持腺体一直处于染液的浸泡中）。 5、压片 换上新鲜染液，放盖玻片，吸去多余染液，进行压片（注意用力均匀、适度！）。 在盖玻片上用中指轻轻压片、再用解剖针柄轻轻敲打，将染色体完全压散，使细胞充分分散。 6、观察 将制片置低倍镜下找到分散好的标本，移至视野中心，然后转到高倍镜下观察。 对分散良好、染色体臂充分伸展的片子，应仔细观察染色体的横纹数量、形状和排列顺序，对照模式照片辨认出不同的染色体臂。 六、实验报告 1、检查你制作的制片，寻找形态良好、分散适中的图象仔细观察各条臂的特点，上交理想的制片，写上姓名。 2、画出你观察到的唾腺染色体图。 《遗 传 学》校 级 精 品 课 程 图1 果蝇的生活史 1.卵 2.一龄幼虫 3. 二龄幼虫 4.三龄幼虫 5.蛹 6.成虫 二、实验材料 一龄幼虫 两龄幼虫 三龄幼虫 果蝇幼虫形态观察 蛹 ?? ?? ?? 果 蝇 唾 腺 染 色 体 果蝇唾腺染色体模式核型 1、选取幼虫 2、腺体剖取 3、腺体解离 4、染 色 5、压 片 6、观 察 五、实 验 步 骤 尾 头 一龄幼虫 两龄幼虫 三龄幼虫 果蝇幼虫 蛹 取两支解剖针，一针压住幼虫身体的近头端1/3处，固定幼 虫，另一针压住幼虫头部，压点尽可能靠头部口器处。 将解剖针平稳前移，使头部与身体拉开，口器部分断开，体内各器官从切口挤出，一对唾腺也随之而出。 唾腺 脂肪体 解剖针 解剖针 《遗 传 学》校 级 精 品 课 程