44 饲料中粗脂肪的测定.ppt

4.4 饲料中粗脂肪的测定 ——索氏提取法 江西农业大学动物科技学院 * 前言 脂类（lipid）亦译为脂质，是一类不溶于水而能溶于非极性溶剂的生物有机分子。其化学本质是脂肪酸和醇所形成的酯类及其衍生物。 脂类的元素组成主要是C H O,有些尚含N S P。 * 前言 按化学组成分类: ◆ 单纯脂类 —脂肪（fat）:甘油三酯（三酰甘油) —蜡（是长链脂肪酸和长链一元醇或固醇形成的酯） ◆ 复合脂类 —磷脂（含磷酸和含氮碱） —糖脂（含糖） —硫脂（含硫酸） ◆ 衍生脂类（类脂）：由单纯脂类或复合脂类衍生而来或与它们关系密切。 —萜类：天然色素、香精油、天然橡胶 —固醇类：固醇（甾醇、性激素、肾上腺皮质激素） —其他类脂：维生素A、D、E、K等。 * 前言 粗脂肪（Crude fat 或ether extract，EE） 饲料中可以溶于脂溶性溶剂（乙醚、石油醚、氯仿等）的物质总称，除包括脂肪外，还包括可溶于乙醚的其它有机物质，如游离脂肪酸、有机酸、腊质、固醇类、脂溶性维生素、色素等，故称为粗脂肪或乙醚提取物。 同时，样品中结合状态的脂类（主要是脂蛋白）不能直接提取出来，所以该法又称为游离脂类定量测定法。 测定方法：油重法、残余法、水解法。 * 一、油重法测粗脂肪含量 1．适用范围 适用于多种单一饲料、混合饲料、浓缩饲料和配合饲料的分析。 2．原理 索氏（Soxhlet）脂肪提取器中用乙醚反复浸提饲料样品，使其中脂类物质溶于乙醚，并收集于盛醚瓶中，然后将所有的浸提溶剂加以蒸发回收，直接称量盛醚瓶中的脂类物质重，即可计算出饲料样品中的粗脂肪含量。 * 一、油重法测粗脂肪含量 2．原理 它是利用溶剂的回流和虹吸原理，对固体混合物中所需成分进行连续提取。当抽提管中回流下的溶剂的液面超过索氏提取器的虹吸管时，抽提管中的溶剂流回圆底烧瓶内，即发生虹吸。随温度升高，再次回流开始，每次虹吸前，固体物质都能被纯的热溶剂所萃取,溶剂反复利用，缩短了提取时间，所以萃取效率较高。 * 一、油重法测粗脂肪含量 3. 试剂 无水乙醚或石油醚（分析纯） 4. 仪器设备 * 一、油重法测粗脂肪含量 4．测定步骤 （1）索氏提取器应干燥无水。抽提瓶(内有沸石数粒)在105±2℃烘箱(4.5)中烘干60min，干燥器中冷却30min，称重。再烘干30min，同样冷却称重，两次重量之差小于0.0008g为恒重。 （2）称取试样1～5g(准确至0.0002g)，于滤纸筒中，或用滤纸包好并标号，放入105℃烘箱中，烘干120min（或称测水分后的干试样，折算成风干样重），滤纸筒应高于提取器虹吸管的高度（？），滤纸包长度应以可全部浸泡于乙醚中为准。 * 一、油重法测粗脂肪含量 4．测定步骤 （3）用长镊子将滤纸筒或包放入抽提管，在抽提瓶中加无水乙醚60～100mL（抽提瓶容积的2/3），在60～75℃的水浴(用蒸馏水)上加热，使乙醚回流，控制乙醚回流次数为每小时约10次，共回流约50次(含油高的试样约70次)或用滤纸点滴检查抽提管流出的乙醚挥发后不留下油迹为抽提终点。 （4）取出试样，仍用原提取器回收乙醚直至抽提瓶全部收完，取下抽提瓶，在水浴上蒸去残余乙醚。擦净瓶外壁。将抽提瓶放入105±2℃烘箱中烘干120min，干燥器中冷却30min称重，再烘干30min，同样冷却称重 ，两次重量之差小于0.001g为恒重。 抽提瓶增加的重量即为粗脂肪重量。 * 一、油重法测粗脂肪含量 5．测定结果的计算 计算见下式： 粗脂肪(％)＝〔(m2－m1)／m〕×100 式中：m ——风干试样重量，g； m1——已恒重的抽提瓶重量，g； m2——已恒重的盛有脂肪的抽提瓶重量，g。 6．重复性 每个试样取两平行样进行测定，以其算术平均值为结果。 粗脂肪含量在10％以上(含10％)允许相对偏差为3％。 粗脂肪含量在10％以下时，允许相对偏差为5％。 * 一、油重法测粗脂肪含量 操作中应注意的问题： ① 测定用样品、抽提器、抽提用有机溶剂都需要进行脱水处理。（为什么，大家想想！） 这是因为：第一，抽提体系中有水，会使样品中的水溶性物质溶出，导致测定结果偏高；第二，抽提体系中有水，则抽提溶剂易被水饱和（尤其是乙醚，可饱和约2％的水），从而影响抽提效率；第三，样品中有水，抽提溶剂不易渗