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医学遗传学实验
人类遗传性状分析
实验原理
本实验通过调查已知的人类遗传性状,了解这些性状的遗传特性。
1、苯硫脲的味觉感受能力
人类味觉对苯硫脲(又称苯基硫代碳酰二胺,PTC)的敏感性由一对等位基因(T、t)控制,属不完全显性遗传。基因型不同的个体尝出含PTC溶液的浓度有明显的差异。为便于研究,将能尝出PTC浓度在1/50000以下苦味者称为尝味者,对PTC浓度在1/24000以上仍感觉无味者称为味盲者。
实验原理
2、人类ABO血型系统的遗传
存在于人类红细胞表面的抗原性质是ABO血型划分的基础,这种抗原决定于9q34上的一对复等位基因:IA、IB和i,且IA和IB对i为显性,IA和IB为共显性。IA决定红细胞表面有抗原A,IB决定红细胞表面有抗原B,i决定红细胞表面无抗原A和B。根据红细胞表面是否含有抗原和所含抗原类型的不同,将人类的ABO血型系统分为A型、B型、AB型和O型四种。此外,在不同血型人的血清中所含抗体不同,即A型血清中含有抗B抗体,B型血清中含有抗A抗体,O型血清中同时含有两种抗体,而AB型血清中则不含有这两种抗体。由于在相应的抗原抗体之间会发生凝集反应,故在输血时对供血、受血者的血型有一定的限制,输血前一定要进行血型的配型。
实验步骤
1、PTC尝味
1)取无菌棉签,分别蘸取不同浓度的PTC溶液,自低浓度向高浓度依次进行尝味。根据本人所感受到苦涩味的最低浓度,确定自己的表现型和基因型。
2)统计本实验室全体同学PTC尝味的表现型和基因型,将统计结果填入下表。
PTC尝味结果统计
实验室名称
总人数
1/750000尝味者(TT)
人数 频率
1/50000尝味者(Tt)
人数 频率
1/24000尝味者(tt)
人数 频率
3)计算基因型频率和基因频率
由于PTC尝味性状为不完全显性遗传,表现型能直接反应出基因型。基因型和基因频率的计算公式如下:
基因型频率=(某种基因型个体数/样本总人数)×100%
基因频率计算:设T的频率为p,t的频率为q
p=TT+Tt/2, q=tt+Tt/2或q=1-p
2、ABO血型遗传分析
1)取冷冻的抗A和抗B血清,室温下化冻备用。
2)采血:用70%的酒精棉球消毒耳垂或无名指末端,再用三棱针快速刺破耳垂或无名指末端的皮肤。待血液流出时(可稍用力挤压),用吸管吸取后加一滴到盛有无菌生理盐水 的0.5ml小试管内,轻轻振荡,使其成为淡红色的血球悬液。
3)取清洁的双凹载玻片一张,在其两端分别用记号笔标记抗A和抗B字样,用滴管分别滴加抗A和抗B血清各一滴于相应的凹面内。
4)用干净滴管吸取受检者血球悬液,分别向标明抗A和抗B的两个圆凹中各滴一滴(滴管末端不得触及标准血清),分别用牙签迅速搅拌使血球混悬,室温下静置10~15分钟。
5)混悬的血球若逐渐由混浊变为透明,且出现了大小不等的红色颗粒,表明红细胞已凝集。如仍为淡红色混浊,不出现颗粒,则为无凝集现象。有时因比重不同血球下沉,貌似凝集,但只要稍加摇动,样本又恢复混浊状态,这种情况则不是真正的凝集。如果分辨有困难,可在低倍显微镜下观察(有时也可用生理盐水代替标准血清作对照)。
6)血型的判定:根据血型检验结果判定表确定血型。
7)将本实验室全体同学的血型检查结果填入下表。
实验室名称
受检总人数
A型人数
B型人数
AB型人数
O型人数
注意事项
1、进行PTC尝味,三种浓度溶液的顺序一定从低到高,不可颠倒!
2、进行血型检测时,带血滴管的末端绝对不得触及标准血清!
3、血型检测态度一定要严肃认真,一丝不苟,当检测结果不能确定时,必须重做。
实验结果
1、计算PTC尝味和ABO血型的基因型频率和基因频率。
2、根据PTC尝味实验的结果,理解不完全显性遗传的特点。
3、掌握ABO血型系统的原理、检测方法、结果分析和血型判定。
4、理解ABO血型系统的配型原则及临床应用意义。
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