微生物生长与繁殖衡量微生物生长的指标-（一）群体的重量.pptVIP

微生物生长与繁殖 衡量微生物生长的指标 (1)群体的重量 (2)群体的数量 第二节 微生物纯培养群体生长规律 三、同步培养 通过诱导或选择，使所有细胞处于同一生长阶段。 低于适温度 适温培养 2、选择法：滤膜过滤 1、诱导法：控制温度、培养基成分等 获得同步培养的方法 硝酸纤维薄膜法 * * 第七章 微生物生长与生活环境 群体水平 胡健 扬州大学环境科学与工程学院Email:huj@yzu.edu.cn 第七章 微生物生长与生活环境 第一节 微生物纯培养 第二节 微生物纯培养群体生长规律 第三节 微生物的生活环境 第一节 微生物纯培养 一、微生物纯培养的概念 实验室条件下， 由一个微生物细胞或一种细胞群繁殖得到的后代。 第一节 微生物纯培养 二、微生物纯培养技术 纯培养基本步骤：　　　　　 稀释平皿法 划线法 单细胞挑取法 纯培养方法 (2) 　 培　　养 　(1) 　分　　离 第一节 微生物纯培养 二、微生物纯培养技术 1、稀释平板分离法：倾注平板法和涂布平板法。 基本过程：（1）梯度稀释过程；（2）分离培养过程 涂布 倾注 梯 度 稀 释 过 程 10-1 10-2 10-3 10-4 10-5 10-6 第一节 微生物纯培养 二、微生物纯培养技术 4) 操作要点： 无菌操作 稀释平板分离法使用过程中的几个问题 1) 梯度稀释度的确定： 需分离微生物在样品中的数量 2) 选择菌落接种的依据： a、菌落特征； b、菌体的特征 3) 微生物纯培养的标准： 菌落特征一致性 2、单细胞挑取法： 从待分离材料中挑取一个细胞来培养，从而获得纯培养的过程。 第一节 微生物纯培养 二、微生物纯培养技术 3、平皿划线法 (P１３９图７-４) 用接种环沾少许待分离的材料，在培养基表面进行多次平行划线，使微生物细胞分开生长以获得微生物纯培养的过程。 第一节 微生物纯培养 二、微生物纯培养技术 第一节 微生物纯培养 三、目标微生物纯培养筛选的基本思路 １、待分离样品的确定 ２、培养基的选择 ３、纯化过程环境条件的控制 　（温度、空气、PＨ、抑制剂） （Ｐ１３８－１４１） （一）纯培养的保存 试管斜面培养基低温、干燥、隔绝空气 第一节 微生物纯培养 四、纯培养的保存与复壮 1、灭菌彻底 2、棉塞大小要合适 3、无菌操作 保存过程的注意点：防止杂菌污染。 （二）纯培养的衰退与复壮 第一节 微生物纯培养 四、纯培养的保存与复壮 衰退的原因：衰老、变异 衰退的表现：生长缓慢 　　　　　　优良性状的丧失 　　　　　　抗逆性下降 衰退的预防：控制继代频率 　　　　　　创造良好的培养条件 　　　　　　采取有效的保存方式 复　　壮 狭义（被动） 广义（主动） 复壮方法：选　　优 　　　　　汰　　劣 第二节 微生物纯培养群体生长规律 微生物生长的指标 (生物量的测定) 细胞群体数量的增加 细胞群体总重量增加 从群体水平上衡量 (间接的测定方法) 一、微生物生长量的测定 第二节 微生物纯培养群体生长规律 微生物生长量的测定 微生物数量的测定 显微镜直接计数法 稀释平板计数法 最大概率法 比浊法 称重法 含N量测定法 DNA含量测定法 ATP含量测定法 代谢活性法 微生物重量的测定 (一) 微生物数量的测定 1、显微镜直接计数法 使用细菌计数板或血球计数板在显微镜下直接计数。 优点：操作简便，计数直观。 一、微生物生长量的测定 第二节 微生物纯培养群体生长规律 (一) 微生物数量的测定 2、稀释平板计数法 对样品稀释培养，据形成的菌落数计数。 优点：传统计数方法。对设备要求不高。 一、微生物生长量的测定 第二节 微生物纯培养群体生长规律 10-3 10-5 10-4 10-6 (一) 微生物数量的测定 ３、比浊计数法 　　　根据细菌悬浮液的吸光度测定其数量。 优点：简便，直接。 一、微生物生长量的测定 第二节 微生物纯培养群体生长规律 (二) 微生物重量的测定 1、称重法 用离心或过滤的方法将菌体从培养基中分离、冼净，称湿重或干重。　　 优 点：简单可靠。 一、微生物生长量的测定 第二节 微生物纯培养群体生长规律 在活性污泥法中采用的指标： （1）混合液悬浮固体(MLSS)（粗放测定）