凝集反应（精品）.ppt

第一节 凝集反应的特点 第二节 直接凝集反应 第三节 间接凝集反应 第四节 自身红细胞凝集试验 课后预习 一、放射免疫技术 二、荧光免疫技术 反向间接凝集反应 抗体 可溶性抗原 载体颗粒 间接凝集抑制试验 用抗原致敏载体--检测抗原 间接凝集抑制反应 凝集 凝集抑制 待检样品 待检样品 间接凝集抑制试验 待测抗原 已知抗体 特异结合 抗原抗体复合物 NS ＋ 致敏颗粒 无凝集颗粒 阳性 间接凝集抑制试验 待测抗原 已知抗体 无结合 抗原抗体分散 NS ＋ 致敏颗粒 有凝集颗粒 阴性 SPA:SPA-IgG Fc; SPA抗体致敏------测抗原 协同凝集试验 原理图 IgG SPA SPA- IgG 待测抗原 SPA- IgG-待测抗原凝集颗粒 混合 加入 二、间接血凝试验 1/2 1/4 1/8 1/16 1/32 1/64 1/128 1/256 1/512 1/1024 Pos. Neg. Titer 64 8 512 2 32 128 32 4 Patient 1 2 3 4 5 6 7 8 反向间接血凝试验 结果示意图 - + ++ +++ ++++ ++++ 效价？ 三、胶乳凝集试验 四、明胶凝集试验 将病毒抗原或重组抗原吸附于粉红色明胶颗粒上，当致敏颗粒与样品血清作用时，若血清含有抗病毒抗体则可形成肉眼可见的粉红色凝集 五、间接凝集反应的应用 抗原的检测 反向间接凝集试验可用于检测病原体的可溶性抗原，也可用于检测各种蛋白质成分。 抗体的检测 　　检测细菌、病毒、寄生虫等感染后产生的抗体。 未经致敏的受检者新鲜红细胞 试剂：抗人O型红细胞的单克隆抗体 临床应用：HIV检测、HBV检测 自身红细胞凝集试验 抗球蛋白试验又称 Coombs试验 第五节 抗球蛋白试验 （一）直接Coombs试验 不完全抗体 检测红细胞上抗体 （二）间接Coombs试验 检测血清中的抗红细胞抗体 临床应用： 在输血上的应用 血型抗原抗体的检查 对新生儿溶血性贫血性疾病的诊断 对溶血性贫血的研究 对细菌或立克次体的不完全抗体检查 冷凝集试验原理 抗原决定簇隐含，不能与抗体结合 混 合 暴露的抗原决定簇与抗体结合 混 合 37℃ 4℃ 37℃ 小结 凝集反应是指细菌和红细胞等颗粒性抗原或表面包被抗原的颗粒性载体与相应抗体结合后，可出现肉眼可见的凝集现象。 可以分为直接凝集反应和间接凝集反应。 在医学检验中最常用的为间接血凝试验、胶乳凝集试验和明胶试验。 抗球蛋白试验又称为Coombs试验，是检测抗红细胞不完全抗体的一种很有用的方法。直接Coombs试验用于病人红细胞上不完全抗体检测；间接Coombs试验用于检测游离的血清中的不完全抗体。 * * * 抗原 抗原 排斥 抗原 抗体 凝集反应 抗原 抗原 抗原 第一节 凝集反应的特点 第二节 直接凝集反应 第三节 间接凝集反应 一、间接凝集反应的类型 二、间接血凝试验 三、胶乳凝集试验 四、明胶凝集试验 五、间接凝集反应的应用 第四节 自身红细胞凝集试验 第五节 抗球蛋白试验 思考题 小结 凝集反应定义 细菌、螺旋体、红细胞或细胞性抗原等颗粒性抗原，或可溶性抗原（或抗体）与载体颗粒结合成致敏颗粒后，它们与相应抗体（或抗原）发生特异性反应，在适当电解质存在下，形成肉眼可见的凝集现象。 反应阶段： 抗原抗体的特异性结合 出现肉眼可见的凝集现象 反应特点： IgM的作用比IgG大数百倍 IgG与抗原结合后，常不出现凝集反应，称不完全抗体 凝集反应 可见反应形成 直接凝集反应(direct agglutination)： 颗粒性抗原直接与抗体结合，在电解质的作用下，出现肉眼可见的凝集现象。 凝集原(agglutinogen)：凝集反应中的抗原。 凝集素(agglutinin)：凝集参与反应的抗体 颗粒性抗原 凝集素 直接凝集反应 1、玻片凝集反应: 已知抗原 + 未知抗体 凝集团块 混浊 ? 2、试管凝集反应： 定量抗原 + 系列稀释抗体 不同程度的凝集反应 YES NO 确定抗体的滴度 （一）玻片凝集试验 + ? 方法评价: 定性试验 简便和快速 敏感度低 应用: 菌种鉴定 血清学分型 血型鉴定 在试管内颗粒性抗原直接与抗体结合，在电解质的作用下，出现肉眼可见的凝集现象。 （二）试管凝集试验 试管凝集试验 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 弃掉0.5 试管凝集试验原理 结果 1 2 3 4 5 6 7