2010-4-8动物细胞工程.ppt

2.2.1动物细胞培养和核移植技术 （一）、概念 是指从动物机体内取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。 注意关键词: 细胞贴壁 接触抑制 原代培养 传代培养 探究 探究 探究 探究 原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。培养的第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代细胞培养。 传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传代培养。 细胞接触抑制 培养器皿 探究： 小结 一、动物细胞培养 1、 概念 2、 原理 3、 过程 4、 条件 5、 应用  动物细胞特点？ 分化潜能变窄：随着细胞分化程度的提高而逐渐受到限制，分化潜能变窄，这是指整体细胞而言。 细胞核仍具有全能性：细胞核，它含有保持物种遗传性所需的全套基因，而且并没有因细胞分化而丢失基因，因此高度分化细胞的细胞核仍具有全能性 根据动物细胞核仍具有全能性的特点,怎样将动物细胞的全能性表达? 试着说出体细胞核移植全过程 你能否提出新的问题 探究 探究 二、单克隆抗体 利用动物体细胞核移植技术 多莉 多莉和“母亲” 卵细胞 C母绵羊子宫 Ａ母绵羊 Ｂ母绵羊 乳腺细胞 细胞质 细胞核 细胞核移植 胚胎移植 早期胚胎 多莉羊 分娩 卵裂 融合后的卵细胞 细胞拆合技术 妊娠 多莉羊的培育过程 （一）、动物细胞核移植的概念： 动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核,移如入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中.使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育为动物个体. 克隆动物：用核移植的方法得到的动物。 （二）、分类： 胚胎细胞核移植： 体细胞核移植： 细胞分化程度低，恢复 全能性容易 细胞分化程度高，恢复 全能性困难 1、此过程中为什么选用MII期（减数第二次分裂中期） 卵母细胞呢？ 2、核移植过程中，怎样促进供体细胞核与去核的卵母细胞融合？ 3、最后产生的犊牛其遗传基础为什么与供体奶牛相同？ 主要通过电刺激 因遗传物质主要位于细胞核中，而融合细胞的细胞核仅由供体奶牛提供。 此时细胞核的位置靠近第一极体，便于用微型吸管将细胞核和第一极体一起吸出。 4、该犊牛的表现型与供体奶牛完全相同吗？为什么？ 不，因为融合细胞的细胞质基因来自MII期卵母细胞（线粒体）。而表现型受核基因和质基因共同控制，同时又受到环境的影响。 5、在体细胞核移植过程中，用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代以内的细胞，那是为什么呢？ 培养的动物细胞一般当传代至10~50代左右时，部分细胞核型可能会发生变化，其细胞遗传物质可能会发生突变，而10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型。因此，在体细胞核移植中，为了保证供体细胞正常的遗传基础，通常采用传代10代以内的细胞。 去核卵母细胞 供体 细胞 重组细胞 重组胚胎 新个体 代孕母牛C 胚胎移植 卵母细胞培养 （三）、体细胞的核移植过程 高产奶牛A 供体细胞培养 供卵奶牛B 电刺激 （四）、体细胞核移植技术的应用前景 1、在畜牧业中可以加速家畜遗传改良的进程 2、保护濒危物种 3、生产医用蛋白质 及组织器官的移植的供体 材料一： 克隆羊“多莉”的摇篮——英国罗斯林研究所曾进行过约３００例羊细胞克隆－移植实验。结果除“多莉”以外，其余克隆羊或胎死腹中，或以畸形问世，而且后者发生几率高达９９％。目前的体细胞动物克隆实验成功率都非常低，据哈里格里芬所长称，小羊“多莉”是两百多个克隆胚胎中惟一的成功者。他说，在公开发表的研究里，克隆胚胎最终成活率大概是２％，实际成功率很可能比这还要低得多。许多动物在即将出生或出生后不久即死去，肺、肾、心血管系统等重要器官出现问题的风险很高。 （五）、体细胞核移植技术存在的问题 材料二 1996年7月5日，苏格兰罗斯林研究所和英国PPL公司共同培育的克隆羊——“多莉”问世，1997年2月23日公布于众，引起各界的普遍关注。 2003年2月14日，罗斯林研究所证实“多莉”已死亡。“多莉”的尸体已解剖并制成标本，现存放于苏格兰国家博物馆。“多莉”的死亡再次引起世界的关注。