抗角蛋白抗体aka检测试剂盒北京和杰创新生物医学科技有限公司.docVIP

抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）检测试剂盒（100人份） 用途： 间接免疫荧光法检测抗中性粒细胞胞浆抗体(Anti-neutrophil Cytoplasm Antibody，ANCA)，辅助诊断和鉴别血管炎疾病。 临床意义及检测原理： ANCA对系统性血管炎，炎性肠病等疾病的诊断与鉴别诊断有重要意义。cANCA诊断韦格纳肉芽肿（WG）的特异性大于90%，敏感性取决于疾病的活动性和病期阶段，抗体滴度与病情活动一致，常作为判断疗效，估计复发的指标。pANCA主要与显微镜下多血管炎（MPA）、坏死性新月体型肾小球肾炎（NCGN）、Charg-Straus 综合征（CSS）相关，IgA型的pANCA有助于将溃疡性结肠炎（UC）与克隆氏病（CD）区别开来。 ANCA的检测采用间接免疫荧光法（Indirect Immunofluorescence IIF），抗原为乙醇和甲醛固定的中性粒细胞，在与病人待测血清反应后，加入荧光素（FITC）标记的兔抗人IgG抗体，最终在荧光显微镜下观察结果。 试剂盒组成： 名称 规格 数量 乙醇/甲醛抗原片 10人份/张 10张 ANCA荧光二抗（直接使用） 3ml/支 1支 ANCA阳性对照（cANCA,，直接使用） 0.3ml/支 1支 ANCA阳性对照（pANCA，直接使用） 0.3ml/支 1支 ANCA阴性对照（直接使用） 0.3ml/支 1支 封片剂（直接使用） 4ml/支 1支 吐温 2ml/支 2支 PBS粉剂 12.2克/袋 2袋 盖玻片 15片/盒 1盒 标本的采集处理和保存： 待测标本最好是新鲜采集的病人血清或血浆，若当时不检测，可将血清或血浆分离出来，置2℃～8℃冷藏保存，一周内检测结果仍然可靠。若标本中有微粒可低速离心后取上清检测。 操作步骤： 准备：取出乙醇/甲醛抗原片，待其恢复至室温后剪开包装。将洗涤用的PBS粉剂用蒸馏水溶解至1L，加入2ml吐温，混匀后作洗涤和标本稀释用。 稀释：待测血清用洗涤液作1:10稀释。 加样：在倒扣板的反应孔内分别加入稀释好的血清和阴阳性对照，25μl/孔。注意：加样时避免产生气泡。 孵育：将抗原片盖在倒扣板对应的凹槽里，室温孵育30min。注意：确保每个标本均能够与抗原基质相接触，而标本之间不相互接触。 洗涤：取出抗原片，用洗涤液轻轻从一侧将反应液冲洗掉，浸泡至洗片缸内，静置5 min后，再用蒸馏水冲洗1次。 加样：在倒扣板的反应孔内加入ANCA荧光二抗，25μl/孔。注意：加样时避免产生气泡。 孵育：用纸擦去抗原片周边和反面多余液体后，将抗原片盖在倒扣板对应的凹槽里，室温孵育30min。注意：确保每个标本均能够与抗原基质相接触，而标本之间不相互接触。 洗涤：重复步骤5)。 封片：?在盖玻片上滴加封片剂。用纸擦干抗原片周边和反面多余液体后，将载片的抗原基质朝下置于准备好的盖玻片上，完成封片。 结果观察：荧光显微镜下观察结果。 结果判断： 荧光显微镜下可见均匀分布的中性粒细胞，阴性时中性粒细胞胞浆部分无特异性荧光染色，细胞较暗，有时有一部分粒细胞（嗜酸性粒细胞，嗜碱性粒细胞）出现颗粒荧光。 乙醇固定的抗原底物片，主要表现为两种阳性荧光型别：中性粒细胞胞浆弥漫性颗粒样染色，并在核叶之间有重染者称之为胞浆型ANCA（cANCA），环绕细胞核周围，成连续带状胞浆亮染者则称之为核周型ANCA（pANCA）。 甲醛固定的抗原底物片上，cANCA仍呈现胞浆型荧光染色，而pANCA则呈现为胞浆型染色（甲醛抵抗型）和无荧光染色（甲醛敏感型）两种。 使用注意事项： 建议在400倍镜下观察结果。 冲洗抗原片时，动作要轻柔，防止抗原组织片脱落。 本试剂盒作定性检测，也可以对阳性标本倍比稀释后作半定量检测。 对照血清经检测HBsAg、抗HCV抗体、抗HIV抗体均为阴性，但试剂盒的所有组分都应视作潜在传染源小心处理。 保存环境及有效期： 试剂盒置2℃～8℃保存，有效期为六个月。 北京和杰创新生物医学科技有限公司 地址：北京经济技术开发区科创十四街99号7号楼3301-3302室 邮编：101111 TEL：010FAX：010网址：