托布津降解菌的分离筛选及鉴定.docVIP

毕 业 论 文 题 目：托布津降解菌的分离筛选及鉴定 学 院： 生命科学学院 专 业： 生物科学 毕业年限： 2013年 学生姓名： 李亮亮 学 号： 200974010121 指导教师： 张爱梅 托布津降解菌的分离筛选及鉴定 李亮亮 指导老师：张爱梅 （西北师范大学 生命科学学院，甘肃 兰州 730070） 摘 要：于2013年9月采集兰州交通大学后山的一处样地土壤，此土壤为长期施用过甲基托布津的蔬菜种植大棚土壤，从中分离纯化出能够降解甲基托布津的菌株1株，并对其进行形态观察及生理生化鉴定后，初步确定该菌株属于葡萄球菌属(Hafnia sp.)。 关键词：细菌；托布津降解菌；分离；鉴定 The separation and identification of bacteria for degrading thiophanate Li Liangliang （College of Life Science，Northwest Normal University，Lanzhou 730070） Abstract: The soil was collected in september 2013 which were used thiophanate long-term. The plots were cultivated vegetable and located on the hill behind Lanzhou Jiaotong university. The one strain was isolated from the soil sample. The strain can degrade thiophanate. The morphological was observed and the physiological and biochemical test were carried out. The strain belongs to Hafnia sp. Keywords: bacteria; degrading thiophanate bacteria; separation; identification 人类从20世纪40年代起开始使用农药除虫除草，每年挽回农业总产量15%左右的损失。但是，长期大量农药的使用，使环境中的有害物质大大增加，危害到生态和人类健康。据报道，农药利用率一般为10%，约90%残留在环境中，造成对环境的污染。 甲基托布津(Topsin-M) 是一种广谱性内吸低毒杀菌剂，通用名称是甲基硫菌灵(thiophanate-methyl)，化学名称是1,2-二（3-甲氧碳基-2-硫脲基）苯，CAS号为23564-05-8，结构式如图1所示。甲基硫菌灵属于苯并咪唑类，纯品为无色结晶，原粉（含量约93%）为微黄色结晶。比重1.5（20℃），熔点172℃，蒸汽压949.1×108Pa（25℃），几乎不溶于水，可溶于丙酮、甲醇、乙醇、氯仿等有机溶剂，对酸、碱稳定[1]。 图1 甲基托布津的分子结构式 Fig1 mildothane molecular structural formula 甲基托布津(Topsin-M)最初是由日本曹达株式会社研制开发出来的。能够有效防治多种作物的病害，如用于小麦、水稻、甘薯、瓜类、番茄、桑树、苹果树、禾谷类、油菜、菜花、甜菜、蔬菜、马铃薯、葡萄、烟草、柑桔树、毛竹、花生、兰花等防治多种病害，其内吸性比多菌灵强。甲基托布津按其化学结构属取代苯类杀菌剂，被植物吸收后即转化为多菌灵，它主要干扰病菌菌丝形成，影响病菌细胞分裂，使细胞壁中毒，孢子萌发长出的芽管畸形，从而杀死病菌，残效期5至7天。主要用于叶面喷雾，也可用于土壤处理。虽然甲基托布津是一种低毒杀菌剂，它既能防治农林病虫害，也会对人畜产生危害，形成农药污染，并且已经发现了多起中毒事件。关于植物源性食品中甲基托布津残留量的检测方法，目前有气相色谱法，紫外分光光度法，气相色谱法，采用本方法对某菜市场交易的植物源性食品样品进行检测，总计检测了38批植物源性样品，包括玉米、黄瓜、青椒、西兰花等品种，结果有2批样品检测出甲基托布津的残留量分别为11.0 mg/Kg、9.2mg/Kg。并且，经呼吸道及皮肤吸收甲基托布津而致急性中毒的事件也早有发生，咪唑类农药慢性中毒时，引起倦乏、头疼、食欲不振、肝脏损害等