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PCR扩增仪.ppt
PCR扩增仪 南京医科大学一附院 钱国华 PCR原理 94℃ 55℃ 70℃ 热变性 退火 引物延伸 2n 加温方法 水浴 电阻丝加热+压缩机制冷 热空气浴 半导体致冷(帕尔元件) 技术指标 温度均一性 ±0.2 ℃ 温控精度 ±0.1 ℃ 温度升降速率 3.5℃/秒 梯度PCR 热盖温度 105 ℃ 提供两种不同的转子 36*0.2ml标准PCR管 72*0.1ml 转子容易更换 满足不同样品量的需求 Four Channel Multiplexing Data 样品数据均一化 阈值选定 Ct值计算 Software Module 准备PCR的混合液 准备系列稀释的标准品 感知液面水平 输入样品名称 输出样品名称 对96, 72 or 36孔模式加样 The CAS-1200 自动化的 Real Time PCR加样,准确性高,节省了人力和时间 小型个性化的“机器人”,成本低 应用于临床和基础研究 还可作其它用途 简单总结 概论 检验仪器主要性能指标 灵敏度 s=⊿y/⊿x 误差 ⊿=x-x0 t=⊿/x0 准确度 a=靶值-实测值 重复性(cv) 分辨率 分辨细微结构的能力 线性范围 0~3A 最小检测量 检测最小量极限 生化分析仪的基本原理 Lamber-Beer定律 T=I/I0=10-kcl A=-lgT=lg(1/T)=kcl A—吸光度 T—透射率 C—浓度 l—光径 K—吸光系数 I0 l I 生化分析仪组成 检测系统 进样、加样系统 清洗系统 反应系统 操作系统 检测系统 光源 卤素灯(氢灯、氘灯、氙灯) 单色器 光栅、棱镜、滤光片 接受器 光电管、光电倍增管、光电二极管 光电二极管阵列 比色杯 光路 前分光光路 后分光光路 生化分析仪主要技术参数 自动化水平 分析速度 分析项目 精度准确度 污染率 相关性 pH测量原理 pH测量原理(血液酸碱度) 血液的pH值为血液的全血或血浆(血液的氢离子)的酸度,即它的氢离子浓度,称作氢离子活性效应和氢离子浓度的产物 pH=-Log(H?) 式中的[H?]指定为氢离子的摩尔浓度。 pH与电压之间的关系可用能斯特方程表示: pCO2测量原理 CO2+H2O=H2CO3=H++HCO3- pH=-lgPC02 pO2测量原理 O2+2H2O---H2O2 H2O2+2e----2OH- 4、电极集成化血气分析仪 免疫反应的特异性和敏感性 方法学灵敏度对比 样品数据均一化 阈值选定 Ct值计算 E=E0—2.3026 pH 电极工作原理图 电极示意图 液体管道系统 分析箱 电极电路、控制系统及后处理电路 加样 分析 打印 集各种消耗品于一片中 一个人使用一片 不同规格可测试不同内容 方便、快速、任何人均可操作 一体化试剂包包含了分析所需的块状电极、 定标液、定标气及废物池,无管道系统。 完全免维护保养 可灵活按需设定分析项目 缺点是试剂包成本高。 介绍几种必威体育精装版血气仪 Nova M 系列 CCX系列 测试项目最全 CCX体积比较小 在96孔板系统中加入ROX内参照和不加内参照分析结果的比较 内标参照用作定量 5000 and 10,000 Copies Run on Rotor-Gene Without ROX reference 系统采用精良的光学和热学设计,即使是不作任何参比,在重复试验的标准差只有0.05 LED激发光源 采用LED激光光源,具有更强的单一波长的激发光,使得发射荧光的信号更强 LED具有更强的能量,输出功率为20mA 四色LED光源,比使用卤钨灯,氩离子激光器具有更长的使用寿命 红,黄,绿,蓝四种颜色的激发波长,覆盖了常用荧光激发的可见光范围,而且彼此之间的光谱交叉小于1% 可检测的染料包括:Fam,Tet,Joe,Vic,Max,Rox,Tamra,Cy3
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