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[临床医学]血液一般检查
血液一般检查 红细胞检查 一、红细胞计数 红细胞(red blood cell)起源于骨髓造干细胞,在促红细胞生成素(erythropoi-etin,EPO)等作用下分化成原始红细胞,再经过数次有丝分裂依次发育为早幼、中幼和晚幼红细胞。晚幼红细胞已丧失分裂能力,经过脱核而成为网织红细胞。此过程约需72h。网织红细胞再经过48h左右即发育成完全成熟的红细胞。成熟红细胞和部分网织红细胞进入外周血。入血后红细胞平均寿命120d。衰老红细胞主要在脾脏破坏,分解为铁、原卟啉和珠蛋白,分别参与铁、胆色素和蛋白质代谢。 红细胞计数(red blood cell count,RBC)即测定单位体积血液中红细胞的数量。其方法有显微镜计数法及血细胞分析仪法本节主要述及显微镜计数法。 红细胞显微镜计数法指用等渗稀释液将血液稀释一定倍数后,滴入改良Neubauer计数板,在显微镜下计数一定范围内的红细胞数,经换自即可求得每升血液中的红胞数。 红细胞稀释液有:①Hayem液:由NaC1、Na2SO4、HgCl2和蒸馏水组成。它们的作用分别是调节渗透压,提高比重防止细胞粘连及防腐。此配方的主要缺点是遇高球蛋白血症患者,由于蛋白质沉淀而使红细胞易凝集。②枸橼酸钠稀释液:配制简单,由枸橼酸钠和甲醛及水组成,此液可使红细胞在稀释后较长时间保持正常形态并且不凝集,故此液应用较广。③普通生理盐水或加1%甲醛的生理盐水:急诊时如无红细胞稀释液可用此液代替。 红细胞数/L=5个中方格内红细胞数×5×10×201×106 【测定方法及评价】同白细胞计数。 【参考值】 成年男性 (4.0~5.5)×1012/L 成年女性 (3.5~5.0)×1012/L 新生儿 (6.0~7.0)×1012/L 【质量控制】 1.计数误差 同白细胞计数。 2.白细胞的影响 经红细胞稀释液处理后,白细胞与红细胞同时存在,通常在计数时把白细胞也计数在内。但在一般情况下白细胞较少,仅相当于红细胞的1/500~1/1000,实际影响很小,可以忽略不计。但如遇白细胞过高者(一般WBC100×109/L),做红细胞计数时,则应将其扣除。方法有两种:一种是直接将病人红细胞数减去白细胞数。 如某病人红细胞数为2.6×1012/L,白细胞数为200×109/L,则病人实际红细胞数为2.4×1012/L。另一种方法是在高倍镜下注意识别,计数时勿将白细胞计入。在高倍镜下,白细胞体积常比红细胞略大,中央凹陷,细胞核隐约可见,无黄绿色折光。 【临床意义】 见血红蛋白测定。 二、血红蛋白测定 血红蛋白(hemoglobin,Hb)是红细胞的主要成分,由珠蛋白(blobin)与亚铁血红素(heme)组成。每个血红蛋白分子有4条珠蛋白肽链,每条折叠的珠蛋白肽链包裹一个亚铁血红素。血红蛋白按不带氧计算,分子量为64458。 珠蛋白具有种属特异性。每个珠蛋白分子含有2条a链和2条非a链。正常成人的Hb A包括含α2β2珠蛋白肽链的HbA(占90%以上),含α2δ2珠蛋白肽链的HbA2(占2%~3%)和含α2r2珠蛋白肽链的(占2%以下)。新生儿和婴儿的HbF含量显著高于成人(新生儿HbF占HbF总量的70%左右),1岁后降至成人水平。 亚铁血红素无种属特异性,即人和各种动物者皆相同。它由2价铁和原卟啉组成。铁原子位于卟啉环中央,具有6条配位键。其中4条与原卟啉中心的4个吡咯氮原子连接。另2条配位键与血红素分子平面垂直,其中1条与珠蛋白肽链F肽段第8个氯基酸——一组氨酸的咪唑氮原子连接;另一条为Hb呼吸载体,与O2结合时形成氧合血红蛋白(oxyhemoglobin,HbO2),如此配位键空着,则称还原血红蛋白(reduced hemoglobin ,Hbred)。 如Fe2+被子氧化成Fe3+,则称高铁血红蛋白(hemiglobin,Hi)或正铁血红蛋白(methemoglobin,MHb)。如与O2结合的配位键被CO、S等占据,则形成各种血红蛋白衍生物,分别称为碳氧血红蛋白(BbCO)、硫化血红蛋白(SHb)等。 在正常情况下,血液中血红蛋白主要为HbO和平共处Hbred,以及少量HbCO2和Hi。在病理情况下,HbCO和Hi可以增多,甚至出现SHb等血红蛋白衍生物。 血红蛋白测定,即测定血液中各种血红蛋白的总浓度。血红蛋白测定方法有多种,目前常用的是氰化高铁血红蛋白测定法和十二烷基月桂酰硫酸钠血红蛋白测定法。 【测定方法及评价】 1.氰化高铁血红蛋白(HiCN)测定法 血液在血红蛋白转化液中溶血后,除SHb外各种血红蛋白均可被高铁氰化钾氧化成高铁血红蛋白(Hi),Hi再与试剂中CN-结合生成
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