[理化生]2、基因工程的基本操作程序.ppt

思 考 和 探 究 2. 根据农杆菌可将目的基因导入双子叶植物的机理，你能分析出农杆菌不能将目的基因导入单子叶植物的原因吗？若想将一个抗病基因导入单子叶植物，如小麦，从理论上说，你应该如何做？ 如果想将一个抗病毒基因转入小麦，也可以用农杆菌，但要注意两点：①要选择合适的农杆菌菌株，因为不是所有的农杆菌菌株都可以侵染单子叶植物；②要加趋化和诱导的物质，一般为乙酰丁香酮等，目的是使农杆菌向植物组织的受伤部位靠拢（趋化性）和激活农杆菌的毒性区（诱导）的基因，使T-DNA转移并插入到染色体DNA上。 思 考 和 探 究 3. 利用大肠杆菌可以生产出人的胰岛素，联系前面有关细胞器功能的知识，结合基因工程操作程序的基本思路，思考一下，若要生产人的糖蛋白，可以用大肠杆菌吗？ 有些蛋白质肽链上有共价结合的糖链，这些糖链是在内质网和高尔基复合体上加工完成的，内质网和高尔基复合体存在于真核细胞中，大肠杆菌不存在这两种细胞器，因此，在大肠杆菌中生产这种糖蛋白是不可能的。 思 考 和 探 究 4.β－珠蛋白是动物血红蛋白的重要组成成分。当它的成分异常时，动物有可能患某种疾病，如镰刀型细胞贫血症。假如让你通过基因工程的方法，使大肠杆菌生产出鼠的β－珠蛋白，想一想，应如何进行设计？ 基本操作如下： （1）从小鼠中克隆出β-珠蛋白基因的编码序列（cDNA）。 （2）将cDNA前接上在大肠杆菌中可以适用的启动子，另外加上抗四环素的基因，构建成一个表达载体。 （3）将表达载体导入无四环素抗性的大肠杆菌中，然后在含有四环素的培养基上培养大肠杆菌。如果表达载体未进入大肠杆菌中，大肠杆菌会因不含有抗四环素基因而死掉；如果培养基上长出大肠杆菌菌落，则表明β-珠蛋白基因已进入其中。 （4）培养进入了β-珠蛋白基因的大肠杆菌，收集菌体，破碎后从中提取β-珠蛋白。 PCR扩增技术与DNA复制的比较 结果 酶 场所 解旋 方式 不同点 条件 原料 原理 相同点 DNA复制 PCR技术 PCR扩增技术与DNA复制的比较 形成整个DNA分子 在短时间内形成大量的DNA片段 结果 细胞内含有的DNA聚合酶 热稳定的DNA聚合酶(Taq酶) 酶 主要在细胞核内 体外复制(PCR扩增仪) 场所 解旋酶催化 DNA在高温下变性解旋 解旋 方式 不同点 模板、ATP、酶、原料、引物 条件 四种游离的脱氧核苷酸 原料 DNA复制(碱基互补配对) 原理 相同点 DNA复制 PCR技术 正确表示基因操作“四步曲”的是（ ） ①提取目的基因 ②目的基因导入受体细胞 ③目的基因与运载体的结合 ④目的基因的检测和表达 A.①②③④ B.④①③② C.①③②④ D.③①②④ C 练 习 13 1993年，我国科学工作者培育成的抗棉铃虫的转基因抗虫棉，其抗虫基因的来源 （ ）A.普通棉花的基因突变 B.棉铃虫变异形成的致死基因C.寄生在棉铃虫体内的线虫 D.苏云金芽孢杆菌体内的抗虫基因 D 某科学家从细菌中分离出耐高温淀粉酶（Amy）基因a,通过基因工程的方法，将a转到马铃薯植株中，经检测发现Amy在成熟块茎细胞中存在。这一过程涉及 （ ）A.目的基因进入受体细胞后，可随着马铃薯的DNA分子的复制而复制，传给子代细胞B.基因a导入成功后，将抑制细胞原有的新陈代谢，开辟新的代谢途径C.细菌的DNA分子较小，可直接作为目的基因，导入受体中不需要整合到马铃薯的DNA分子中D.目的基因来自细菌，可以不需要运载体直接导入受体细胞 A 在基因工程中，切割载体和含有目的基因的DNA片段中，一般需使用 （ ） A.同种限制酶 B.两种限制酶 C.同种连接酶 D.两种连接酶 A 水母发光蛋白由236个氨基酸构成，其中有三种氨基酸构成发光环，现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记。在转基因技术中，这种蛋白质的作用（ ） A.促使目的基因导入宿主细胞中 B.促使目的基因在宿主细胞中复制C.使目的基因容易被检测出来 D.使目的基因容易成功表达 C 有关基因工程的叙述正确的是（ ） A.限制酶只在获得目的基因时才用 B.重组质粒的形成是在细胞内完成的 C.质粒都可作为载体 D.蛋白质的结构、成分为合成目的基因提供资料 D 在基因工程技术中，下列方法与目的基因获得无关的是( ) A.辐射诱变法 B.“散弹射击法” C.反转录法 D.人工合成法