[理化生]31菊花的组织培养.ppt

活动1： 1、什么是细胞分化？细胞分化的原因和结果？ 2、愈伤组织是怎样形成的？有什么特点？ 3、组织培养的过程？以及组织培养的理论基础？ 4、脱分化、再分化？ 5、影响植物组织培养的因素？ 6、菊花组织培养的过程，及注意的问题？ （二）激素配比对组织培养的影响 活动2： 用自己的话把菊花组织培养的操作流程给描述出来? 问题：1、怎样配制MS培养基? 2、选取菊花的哪个部位做外植体？ 3、对外植体消毒应考虑哪些问题？ 4、外植体消毒应如何进行? 5、接种时应特别注意什么？ 6、培养的条件？ 7、幼苗在移栽入土之前需进行哪些处理工作？ 本课题内容小结 配置培养基 分装到锥形瓶中，每瓶分装50ml或100ml ① 配制培养液 ② 调PH ③ 培养基的分装 由于菊花的茎段的组织培养比较容易，因此不必添加植物激素 3、灭菌 分装好的培养基连同其他器械一起进行高压蒸汽灭菌 1、选材：菊花茎段，取生长旺盛的嫩枝 （二）外植体消毒 2、消毒 ② 酒精处理 用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入体积分数为70％的酒精中摇动2－3次，持续6－7s，立即将外植体取出，在无菌水中清洗 ③消毒液处理 取出后用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入质量分数为0.1％的氯化汞溶液中1－2min，取出后在无菌水中至少清洗3次，漂净消毒液 ①流水冲洗 菊花茎段用流水冲洗后可少许洗衣粉，用软刷轻轻刷洗，刷洗后在流水下冲洗20min左右 （三）接种 污染的主要来源是空气中的细菌和孢子，接种室消毒是至关重要的。用70％的酒精喷雾使空气消毒， 酒精或新洁尔灭搽洗工作台并用紫外线照射20分钟 1、接种室消毒 2、无菌操作要求 操作要在酒精灯火焰旁完成，每次使用器械后，都需要用火焰灼烧灭菌，接种后立即盖好瓶盖。 3、材料的切取和接种 接种注意事项 ①每接种一块外植体前，镊子需放入体积分数为75％的酒精溶液中消毒一次，然后在酒精灯火焰上烧一遍，冷却后再接种 ②外植体在培养基中要分布均匀，放置外植体数量根据锥形瓶的大小确定，一般胡萝卜3－4块，菊的茎或叶6－8块，也不要太少，以充分利用培养基中的营养成分和光照条件 ③插入时应注意方向，不要倒插。茎段、茎尖基部插入培养基利于吸收水分和养分 思考：你打算做几组重复？你打算设置对照实验吗？ 答：每种材料或配方至少要做一组以上的重复。 设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养基的锥形瓶，与接种操作后的锥形瓶一同培养，用以说明培养基制作合格，没有被杂菌污染。 （四）培养 1、愈伤组织的培养 从接种外植体到出现愈伤组织需经过2周时间。2周之内可以看到外植体上逐渐长出乳白色或黄白色的瘤状愈伤组织。首次培养愈伤组织时，恒温箱的门应该关闭不必见光，因为在无光条件下愈伤组织长的更快。2周后，培养基成分接近耗尽，必须更换培养基，进行继代培养 继代培养所用的培养基与培养愈伤组织的相同，在严格的无菌条件下，将愈伤组织连同原来的外植体一起移到新培养基上。愈伤组织的继代培养一代为20d。如果延长时间，培养基中营养物质减少，外植体会分泌有毒物质，造成自身中毒。如果愈伤组织长到直径为1－1.5cm时，就可以进行试管苗培养，否则还需进行第二代继代培养 2、愈伤组织的继代培养 在愈伤组织继代培养期间，将恒温箱的门打开，让愈伤组织见光，愈伤组织见光后颜色可以转为绿色 （六）栽培 3、移栽 珍珠岩：固体基质型，含水量高、蓄水性强、透性好，适合栽培 幼苗长壮后，移栽到土壤中 幼苗移栽后，每天观察并记录幼苗的生长情况，适时浇水、施肥，直至开花 * * 组织培养 营养繁殖 扦插 嫁接 压条 课题1 菊花的组织培养 课程标准 尝试进行植物的组织培养。 课标解读 1.了解植物组织培养在生产上的应用。 2.熟悉植物组织培养的过程。 3.理解植物细胞的脱分化和再分化。 　　　　是指在人工培养基上，离体培养植物的器官、组织、细胞，并使其生长、增殖、分化以及再生长成植株的技术。 组织培养 1、细胞分化的原因是什么？ 在特定的时间和空间条件下，基因的选择性表达。 思考： （一）植物组织培养的基本过程 细胞分化 个体发育中细胞在形态、结构和生理功能上出现稳定性差异的过程 愈伤组织 愈伤组织是通过细胞分裂形成的，其细胞排列疏松而无规则，高度液泡化呈无定形状态的薄壁细胞。 人参的愈伤组织 菠萝的愈伤组织 离体的植物器官、组织、细胞 脱分化 愈伤组织 再分化 根 芽 植物体 2、植物组织培养的基本过程 2、植物组织培养过程: 离体组织