[理化生]基因工程的操作步骤.ppt

嫩江县高级中学生物组;学习目标;;一、目的基因的获取;1、从基因文库中获取目的基因; 真核生物的基因用逆转录法得到的cDNA与原基因相同吗？有哪些差异？;依据：目的基因的有关信息。 如：根据基因的核苷酸序列 基因的功能 基因在染色体上的位置 基因的转录产物mRNA 基因翻译产物蛋白质等特性;;;2、利用PCR技术扩增目的基因;5’;PCR技术;③过程：;③过程：;PCR反应体系中目的基因成指数(2n)形式扩增;④方式：以_____方式扩增，即____（n为扩增循环的次数）;;?;蛋白质的氨基酸序列;反转录法;（1）用一定的_________切割质粒，使其出现一个切口，露出____________。 （2）用___________切断目 的基因，使其产生_____ ____________。;质粒;Hin d限制性酶ⅠⅡ;2.基因表达载体的组成：;3、基因表达载体的作用;①载体与表达载体的区别：二者都有标记基因和复制原点两部分DNA片段。表达载体在载体基础上增加了目的基因、启动子、终止子三部分结构 ②用到的工具酶：既用到限制酶切割载体，又用到DNA连接酶将目的基因和载体拼接，两种酶作用的化学键都是磷酸二酯键 ③启动子、终止子对于目的基因表达必不可少 ④目的基因不能单独进入受体细胞，必需以表达载体的方式携带进去。;常用的受体细胞：;1、将目的基因导入植物细胞;（2）基因枪法——微弹轰击法;（3）花粉通道法;2、将目的基因导入动物细胞 ①方法：显微注射法 ②程序： ;3、将目的基因导入微生物细胞; 将目的基因导入受体细胞;目的基因的表达和检测;检测;归纳: 基因工程的基本操作程序;2、下列属于获取目的基因的方法的是( ) ①利用mRNA反转录形成 ②从基因组文库中提取 ③从受体细胞中提取 ④利用PCR技术 ⑤利用DNA转录 ⑥人工合成 A.①②③⑤ B.①②⑤⑥ C.①②③④ D.①②④⑥;3、 在基因工程中，把选出的一个目的基因（共1000个脱氧核苷酸对，其中腺嘌岭脱氧核苷酸是460个）放入DNA扩增仪中扩增4次，那么，在扩增仪中应放入胞嘧啶脱氧核苷酸的个数是（ ）个;;课代表总结各 小组表现 表彰先进 教师点评 布置预习