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核 酸 (Nucleic Acid) 一、核酸的概念和重要性 (二)核酸的重要性 二、核酸的类别、分布和组成 三、核苷、核苷酸 2.核苷酸的性质 (三)核苷酸的重要衍生物 四、DNA的结构 2.DNA分子中核苷酸的排列顺序 (二)DNA的二级结构 (三)DNA的三级结构 (二)核苷酸(nucleotide, Nt) 1.核苷酸的结构 (1)(核糖)核苷酸(ribonucleotide): 2’,3’,5’一核糖核苷酸 (2′-AMP) (3′-AMP) (5′-AMP) 3’,5’一脱氧核糖核苷酸 Deoxyadenosine 3’- monphosphate (3’- dAMP) Deoxyadenosine 5’- monphosphate (5’- dAMP) (2)脱氧(核糖)核苷酸(deoxyribonucleotide): (1)一般物理性质 (2)互变异构现象 (3)紫外吸收 4种单核苷酸吸收光谱的标准比值 0.28 0.40 0.68 0.68 1.15 1.22 5’-GMP 0.03 0.03 0.40 0.38 0.73 0.74 5’-UMP 0.003 0.03 0.15 0.22 0.80 0.85 5’-AMP 0.30 1.55 0.99 2.10 0.84 0.46 5’-CMP 7.0 2.0 7.0 2.0 7.0 2.0 290/260 280/260 250/260 光密度 比值 pH 核苷酸 A260:样品在260nm处的吸收值 E260:所测核苷酸的摩尔消光系数 C: 核苷酸样品的浓度(mg/ml) 核苷酸(mg) = × Mr × N × V 胞嘧啶核苷酸的解离 (4)核苷酸的两性解离和等电点 4种核苷酸的解离曲线 可在pH2.0~5.0之间分离各种核苷酸 pH3.5时各核苷酸所带电荷 -1 +0 -1 UMP -0.16 +0.84 -1 CMP -0.95 +0.05 -1 GMP -0.46 +0.54 -1 AMP 净电荷 碱基的电荷 磷酸基电荷 核苷酸 1.ATP类的高能磷酸化合物 2.环状核苷酸 胞内 ATP cAMP + PPi 磷酸二酯酶 5′-AMP 腺苷酸环化酶 (AC) 3.核苷多磷酸类 (一)DNA的一级结构Primary structure 1.DNA分子中核苷酸的连接方式 5’→3’ RNA 简写方法:线条式、文字式 英国Sanger 1975年加减法,1977年末端终止法 美国Maxam和Gilbert 1977年化学断裂法 (1)酶法(双脱氧法、末端终止法) 1.提出DNA双螺旋结构模型的根据 (1)x-光衍射分析 20世纪40年代Astbury 1952年M.Wilkins (2)DNA碱基组成的定量分析 20世纪40年代chargaff规则 ① DNA碱基组成有种的特异性,但没有组织、器官特异性。 ② A=T;G=C;A+G=T+C 2.DNA双螺旋结构模型(double-helical structure) 1953年Watson和Crick提出了DNA双螺旋结构。 (3)碱基、糖、磷酸的位置。 DNA双螺旋结构要点: (1)两条反向平行的多核苷 酸链,右手双螺旋。 (4)双螺旋的直径,螺距。 (2)大沟(深沟) 小沟(浅沟) (5)碱基配对 (6)碱基的序列 * * 主要介绍碱基、核苷、核苷酸和核酸的结构、性质和功能,核酸的分离、提纯、鉴定等。 (一)核酸的概念 核酸英文名nucleic acid(NA) 1868年瑞士F. Miescher(米歇尔)发现了核酸。 核酸是由几十个甚至几千万个核苷酸聚合而成的具有一定空间结构的大分子化合物。 核蛋白 磷酸 核苷 碱基 戊糖 蛋白质 核酸→核苷酸 (一)类别 nucleic acid ribonucleic acid, RNA deoxyribonucleic acid, DNA (二)分布 (三)组成 1.碱基(base):又称含氮碱 (1)嘧啶碱(pyrimidine, Py) (2)嘌呤碱(purine, Pu) 其它嘌呤(核酸的代谢产物): 黄嘌呤、次黄嘌呤、尿酸等 (3)修饰碱基(modified base): 也称稀有碱基(minor

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