[理学]武汉大学分析化学课件_第23章_分子质谱法.ppt

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 23.6.4. 分子质谱分析的应用 单克隆抗体基质辅助激光解吸电离质谱图 人血清蛋白的基质辅助激光解吸电离质谱图 23.7.气相色谱-质谱联用 质谱直接分析样品要求是纯或比较纯的，如为简单混合物，则各组分应具有基本互不干扰的特征质谱峰。对于成分复杂混合物，由于杂质峰、碎片峰等重叠、干扰，谱图过于复杂，难以进行多组分的分析、鉴定。 色谱是目前分离复杂混合物最有效的方法，然而由于色谱自身不具备定性能力或定性可靠性欠佳。将色谱分离能力与质谱定性、结构鉴定能力结合起来，可实现复杂混合物的分析。 目前，质谱与其他技术的联用已经非常广泛，如气相色谱－质谱联用（GC-MS）、液相色谱－质谱联用（LC-MS）、质谱－质谱联用（又称串连质谱, MS-MS）、傅立叶变换红外－质谱联用（FTIR-MS）、毛细管电泳－质谱联用(CE-MS)等。 23.7.1.气相色谱－质谱联用仪器 23.7.2.GC-MS联用中的技术问题 . GC-MS接口 理想的接口应当能够除去全部载气，然而却不损失待测样品组分。 1.直接导入型接口 23.7.2.GC-MS联用中的技术问题 . GC-MS接口 2.开口分流型接口（Open-Split Coupling） 1.限流毛细管，2.外套管，3.中隔板，4.内套管 23.7.2.GC-MS联用中的技术问题 . GC-MS接口 3.喷射式分子分离器接口 23.7. 3.对GC的要求 色谱分离柱的选择，必须采用充分老化或限制使用温度的方法，尽量避免色谱柱的固定液流失以降低质谱仪器检测噪声。必须根据接口部件的特点选择不同类型的色谱柱。 对载气亦有一定的要求，载气必须纯度高、化学稳定性好、易于和待测组分分离、易于被真空泵排出。通常在GC-MS中选用的载气为氦气，纯度在99.995%以上。 23.7. 4. 对MS的要求 质谱仪器的真空系统必须具备很高的效率、大的排空容量，以利于将载气最大限度的抽出质谱仪器，避免载气对待测样品的电离、分析等干扰。 另外，质谱仪必须具备高的扫描频率：气相色谱分离高效、快速，色谱峰都非常窄，有的仅几秒钟时间。一个完整的色谱峰通常需要6个以上的数据采集点，质谱仪必须具备较高的扫描速度，才可能在很短的时间内完成多次全质量范围的扫描。 23.7. 5. GC-MS分析方法 为了使每个组分都实现良好的分离与鉴定，必须设定合适的色谱和质谱分析条件。 色谱条件包括色谱柱的类型（填充柱或毛细管柱）、固定液种类、载气种类、载气流量、样品汽化温度、分流比、程序升温方式等。设置的一般原则是：优先选用毛细管气相柱、极性样品使用极性柱、非极性样品采用非极性柱、未知样品可先尝试中等极性的色谱柱，尔后根据实际情况做适当调整。 质谱工作条件包括电离电压、扫描速度、扫描质量范围、扫描模式等等，这些均要根据实际样品情况、实际测试需求进行设定。 23.7.6. GC-MS数据的采集 GC-MS数据的采集与质谱仪器对数据的采集相同，如分离分析含50个组分的样品，则每个样品需采集105以上质谱数据，采集和处理数据量比一般分析单一成分纯样品大得多。 1. 总离子流色谱图 23.7.6. GC-MS数据的采集 2. 质谱图 由总离子流色谱图可以得到任何一组分的质谱图，离子流进入质量分析器，只要设定好分析器扫描的质量范围和扫描时间，计算机就可以采集到每个组分洗出过程中连续的质谱信号。如果色谱分离良好，根据扫描速度，每个色谱峰可采集到多组分全扫描质谱图，且同一组分不同色谱峰位置的质谱图应基本一致，但强度不同。 3.质量色谱图 总离子流色谱图是将单位时间内所有离子加合得到的。也可以通过选择不同质量的离子做质量色谱图(MC)，使色谱不能分开的两个峰实现分离，以便进行定性、定量分析。 4. 库检索 23.7.7. GC-MS灵敏度 GC-MS灵敏度是指在一定的样品、一定的分辨率下，产生特定信噪比的分子离子峰所需的样品量。 23.7.8. GC-MS的应用 1、GC-MS检测猪肉中的克伦特罗 经BSTFA衍生的克伦特罗质谱图 23.7.8. GC-MS的应用 1、GC-MS检测猪肉中的克伦特罗 添加20μg/kg克伦特罗猪肉样品的选择离子（m/z86）色谱图