[理学]第10章 酶促反应动力学.ppt

酶的竞争性抑制作用 酶的非竞争性抑制作用 E + S ?? ES ?? P + E + I EI + S?? ESI ?? P + E + I 底物和抑制剂同时和酶结合，两者无竞争作用。I与S结构无共同之处，酶活性降低或被抑制，不能用增加底物浓度来解除抑制。 酶的非竞争性抑制作用 酶的反竞争性抑制作用 酶只有与底物结合后才能与抑制剂结合。L-Phe，L-Arg等对碱性磷酸酶的作用是反竞争性抑制，肼类化合物抑制胃蛋白酶、氰化物抑制芳香硫酸酯酶的作用也属此类。 10.2.4 可逆与不可逆抑制的鉴别 Shi, G., et al. Environ Health Perspect, 2009. 117(3): p. 379-86 10.2.5 -竞争性抑制作用动力学 [E] = [Ef] + [ES] + [EI] Vmax = k3 [E] v = k3[ES] Vmax v = [Ef] + [ES] + [EI] [ES] Km = [Ef][S] [ES] [Ef]=[ES] Km [S] Ki = [Ef][I] [EI] [EI]=[Ef] [I] Ki 10.2.5- 竞争性抑制作用动力学 10.2.5- 非竞争性抑制作用动力学 10.2.5- 反竞争性抑制作用动力学 10.2.5- Dixon作图法求Ki 随[I]的增加… 类型 Vmax Km 竞争性抑制 不变 增加 非竞争性抑制 减小 不变 反竞争性抑制 减小 减小 10.2.6 一些重要的酶抑制剂 不可逆抑制剂： 非专一性抑制剂：有机磷化合物、有机汞砷化合物、 重金属盐、氰化物、硫化物、CO、青霉素等 专一性抑制剂：TLCK（对甲基苯磺酰-L-赖氨酰氯甲酮） ?-卤代-D-Ala是丙氨酸消旋酶的抑制剂 可逆抑制剂：磺胺药（如对氨基苯磺酰胺） 10.2.6 一些重要的酶抑制剂 二异丙基氟磷酸：抑制胆碱酯酶活性，使乙酰胆碱不能被分解成乙酸和胆碱，引起乙酰胆碱的积累，使神经处于过渡兴奋状态，因此此类化合物又称神经毒气。 10.2.6 一些重要的酶抑制剂 有机磷化合物：抑制蛋白酶或酯酶活性 敌敌畏 敌百虫 萨林 10.2.6 一些重要的酶抑制剂 有机砷化合物：与酶的巯基结合而抑制活性 路易斯毒气 10.2.6 一些重要的酶抑制剂 苯甲脒是胰蛋白酶的竞争性抑制剂 苯甲脒 10.2.6 一些重要的酶抑制剂 对氨基苯磺酰胺是二氢叶酸合成酶的竞争性抑制剂 （在细菌中催化对氨基苯甲酸合成二氢叶酸） 对氨基苯甲酸 对氨基苯磺酰胺 磺胺类药物可与对氨基苯甲酸竞 争二氢叶酸合成酶，影响FH2的 合成，导致细菌生长繁殖受抑制， 达到治病效果。 10.2.6 一些重要的酶抑制剂 过渡态底物类似物作为酶的竞争性抑制剂 腺苷 次黄嘌呤腺苷 羟化嘌呤核苷 10.2.6 一些重要的酶抑制剂 过渡态底物类似物作为酶的竞争性抑制剂 酵母醛缩酶反应 磷酸乙二醇羟胺 10.3 温度对酶反应的影响 最适温度 受诸多因 素影响 温度系数Q10：2左右 温度升高反应速率加快，但过高酶蛋白变性 10.3 温度对酶反应的影响 1 min incubation 10 min incubation 10.4 pH对酶反应的影响 1、影响酶蛋白构象，甚至失活 2、影响底物、酶、中间产物的 解离状态 3、影响侧链基团的解离，从而 影响酶活性中心 10.4 pH对酶反应的影响 木瓜蛋白酶 胃蛋白酶 胰蛋白酶 胆碱酯酶 不同反应体系影响酶的最适pH 10.5 激活剂对酶反应的影响 酶激活剂：简单有机物或无机小分子，如Mg2+是多数激酶及 合成酶的激活剂，Cl-是唾液淀粉酶的激活剂。 激活剂对酶的作用具有选择性： Mg2+对脱羧酶有激活作用而 对肌球蛋白三磷酶却抑制作用。 离子之间有拮抗作用：Na+抑制K+激活的酶，Ca2+抑制Mg2+激 活的酶。 Cys、GSH等还原剂对某些巯基酶有激活作用，使二硫键还原 成巯基提高酶活性。 本章总结 影响酶促反应速率的因素： 底物浓度； 酶浓度； 抑制剂； pH; 温度； 激活剂； 米氏方程： 方程推导； 参数求解； 抑制剂酶促动力学 第十章：酶促反应动力学 主 要 内 容 底物浓度对酶促反应速率的影响 酶的抑制作用 温度对酶促反应的影响 pH