[理学]转染试剂精粹.ppt

* ATCC Collections 细胞株 菌株 真菌 原生物 动植物病毒 ATCC (1925) 是世界上最大的生物资源中心， 由美国14家生化医学类行业协会组成的理事会负责管理，是一家全球性非盈利的生物标准资源中心。 * Roche和ATCC合作 我们提供一个可以有哪些信誉好的足球投注网站到Fugene系列转染试剂转染的细胞株数据库，提供转染效果评价，可以直接连接到相关的操作指南和参考文献。 ATCC的网站上已经有上百种使用罗氏应用科学部的产品后获得成功转染的细胞株的信息。 信息的整合将会提高实验设计的效率和细胞转染的成功率。 * FuGENE? HD Transfection Reagent Cost effective pack size for sampling purposes only. It is NOT the intention to actively sell this Trial-Pack to customers that only need smaller amounts of transfection reagent. For these customers, the 0.4 ml pack size remains to be the product of choice. Transfection Reagents – currently available to the market – that do not contain components from animal and human origin: FuGENE? HD Transfection Reagent, Lipofectamine 2000 CD (CD = abbreviation of Chemically Defined) from Invitrogen and the new Lipofectamine LTX Reagent from Invitrogen. All other transfection reagents (such as Lipofectamine and Lipofectamine 2000 from Invitrogen, TransIT from Mirus, Genejuice from Merck/Novagen) and FuGENE? 6 Transfection Reagent do contains components from animal or human origin. Results: In two separate experiments using two cell lines, FuGENE HD transfection reagent produced a significant lower number of off-target effects compared to the reagent from another supplier. FuGENE? HD Transfection Reagent has also proven high effective for protein expression using insect cell lines such as High Five and Sf9. Diagnostics Diagnostics 细胞转染的方法和产品精粹 FuGENE? HD：颠峰之作 * 何谓转染技术：是指将外源分子如DNA，RNA等导入真核细胞的技术，它是研究基因表达调控，突变分析等的常规工具。随着功能研究的兴起，其应用越来越广泛。 目的：对基因调节以及蛋白质的表达和功能等进行研究  常规转染技术可分为两大类，一类是瞬时转染，一类是稳定转染（永久转染）。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色体中，因此一个宿主细胞中可存在多个拷贝数，产生高水平的表达，但通常只持续几天，多用于启动子和其它调控元件的分析。后者也称稳定转染，外源DNA既可以整合到宿主染色体中，也可能作为一种游离体（episome）存在。外源DNA整合到染色体中概率很小，大约1/104转染细胞能整合，通常需要通过一些选择性标记，如来氨丙基转移酶（APH新霉素抗性基因），潮霉素B磷酸转移酶（HPH），胸苷激酶（TK）等反复筛选，得到稳定转染的同源细胞系。 转染的种类 细胞转染方法介绍 I 利用载体分子 (化学方法)：化学物质辅助 II 直接进入细胞质：物理方法 III 利用病毒载体 利用载体分子 1. 磷酸钙 首先由Graham 和 van der Eb在1973年发现,