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项目八 微生物基础知识和 基本技能 任务要求 掌握微生的基础知识。 掌握玻璃器皿的包扎和灭菌 掌握培养基的制备。 掌握微生物的接种、分离、计数等基本技能 * * 一、接种 将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种。 图5-1-1接种和分离工具 1.接种针 2.接种环 3.接种钩 4.5.玻璃涂棒 6.接种圈 7.接种锄 8.小解剖刀 1.接种工具 2.常用的接种方法有以下几种: 1)划线接种 2)三点接种 3)穿刺接种 4)涂布接种 5)液体接种 6)注射接种 3.无菌操作 培养基经高压灭菌后,用经过灭菌的工具(如接种针和吸管等)在无菌条件下接种含菌材料(如样品、菌苔或菌悬液等)于培养基上,这个过程叫做无菌接种操作。在实验室检验中的各种接种必须是无菌操作。 实验台面不论是什么材料,一律要求光滑、水平。 在实验台上方,空气流动应缓慢,杂菌应尽量减少,其周围杂菌也应越少越好。 空气中的杂菌在气流小的情况下,随着灰尘落下,所以接种时,打开培养皿的时间应尽量短。 用于接种的器具必须经干热或火焰等灭菌。 图4-1-2斜面接种时的无菌操作 (1)接种灭菌 (2)开启棉塞 (3)管口灭菌 (4)挑起菌苔 (5)接种 (6)塞好棉塞 二、分离纯化 含有一种以上的微生物培养物称为混和培养物。如果在一个菌落中所有细胞均来自于一个亲代细胞,那么这个菌落称为纯培养。在进行菌种鉴定时,所用的微生物一般均要求为纯的培养物。得到纯培养的过程称为分离纯化,方法有许多种。 1.平板划线分离培养 2.稀释倾注平板分离培养 3.选择培养基和鉴别培养基分离培养 4.单细胞分离培养 平板划线法 平板画线法 A 扁形划线B连续划线 C方格划线 三、培养 微生物的生长,除了受本身的遗传特性决定外,还受到许多外界因素的影响,如营养物浓度、温度、水分、氧气、pH等。微生物的种类不同,培养的方式和条件也不尽相同。 营养物浓度 温度 水分 氧气 1.影响微生物生长的因素 2.培养方法 根据培养时是否需要氧气,可分为好氧培养和厌氧培养两大类。 根据培养基的物理状态,可分为固体培养和液体培养。 四、仪器 电热恒温培养箱 超净工作台 高压蒸汽灭菌器 * * * * * * * * * * * * *
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