临床微生物学肺炎链球菌检验参考.ppt

致病性球菌 葡萄球菌属 金黄色葡萄球菌 表皮葡萄球菌 链球菌属 链球菌 肺炎链球菌 奈瑟菌属 脑膜炎奈瑟菌 淋病奈瑟菌 肺炎链球菌 (S.pneumoniae) 属链球菌科，链球菌属。 广泛分布于自然界，主要寄生于人类上呼吸道，多数不致病。 一、生物学性状 1．形态结构 2．培养特性 3．生化反应 4．抗原结构 5．抵抗力特点 6. 变异性 1.形态结构 G+，呈矛尖状，成双排列，标本或液体培养中成链状。 有荚膜，无鞭毛，不形成芽胞。 2.培养特性 营养要求较高，含血液或血清的培养基中生长。 兼性厌氧，C02 5-10%生长最好。 溶血性——菌落周围有草绿色溶血环。 液体培养基中培养24h，呈均匀混浊，后期因产生自溶而变得澄清 3．生化反应 可分解多种糖类，产酸不产气。 胆汁溶解试验阳性：加入胆汁或10%去氧胆酸钠，37℃.，5-10min，激活本菌的自溶酶，出现溶菌现象。 Optochin敏感试验阳性：单个菌落涂于血平板上，用optochin纸片贴于接种区中央，35℃需氧培养过夜，抑菌圈 18mm。 4．抗原结构 荚膜多糖抗原：多糖抗原，型特异性，共85型，Ⅰ~Ⅲ型引起大叶性肺炎。 菌体种属特异性抗原：多糖抗原，存在于细胞壁，称C多糖。在钙离子存在时,C多糖可与正常人血清中称为C-反应蛋白(C reactive protein,CRP)的β球蛋白结合，发生沉淀。 5．抵抗力特点 较弱，加热56℃ ，20min即死亡。 对一般消毒剂敏感，对干燥抵抗力较强。 6. 变异性 荚膜变异：有荚的光滑（S）型菌有毒力，失去荚膜的粗糙（R）型毒力减低或消失。 20、把小鼠随机分成两组，进行肺炎球菌荚膜形成试验，分别将两株细菌接种于不同组动物腹腔（每组接种一株细菌）。12小时后杀死小鼠解剖，取腹腔作荚膜染色试验。结果有一组只有少量细菌，且未见荚膜主要原因是什么？ A、 动物对细菌不敏感　　 B、 染色试剂不合标准　 C、 细菌毒力发生了变异 D、 采标本时间过早 二、致病性 1．致病物质 2．所致疾病 1. 致病物质 荚膜：肺炎球菌的致病力，主要是荚膜的抗吞噬作用。 溶血毒素“O”：自溶后释放，能溶解人和动物的红细胞，高浓度对动物有坏死及致死作用。 2. 所致疾病 存在于正常人上呼吸道。 仅在人体抵抗力下降时才引起疾病。如大叶性肺炎，支气管炎等。 三、微生物学检验 (一) 标本采集 痰、脓液、血液等。 (二) 检验方法及鉴定 1. 直接涂片 革兰氏色染色，荚膜染色 2. 分离培养。 ① 胆汁溶菌试验。 ② 菊糖发酵。 ③ Optochin试验。 与草绿色链球菌鉴别 3. 小鼠毒力试验 有毒力的菌株，接种后12-36h，死亡。 第四节  奈瑟菌属 （neisseria） 为一群G-双球菌，严格寄生菌，人是自然宿主 主要致病菌是脑膜炎球菌(merningococcus)和淋病球菌(gonorrhoeae) 一、脑膜炎球菌 即脑膜炎奈瑟菌， 是流行性脑脊髓膜炎的病原体 （一）、生物学性状 1．形态结构 2．培养特性 3．生化反应 4. 抗原结构 5. 抵抗力特点 1．形态结构 G-，肾形成双排列 在患者脑脊液标本中位于中性粒细胞内 无芽胞、无鞭毛，具有荚膜、菌毛。 2．培养特性 营养要求高，必须在含有血清或多种氨基酸、无机盐的培养基上生长良好。 血平板：半透明，灰褐色，圆形，湿润光滑露滴样菌落。 易自溶。 巧克力平板，蓝灰色，半透明，光滑湿润的菌落。 卵黄双抗（EPV）平板：为无色，光滑湿润的菌落。 血清肉汤：呈微混浊。 3.生化反应 分解葡萄糖、麦芽糖 硝酸盐还原反应阴性，不分解尿素 氧化酶试验阳性 4.抗原结构 可分9个血清群，对人致病的主要试A群 5．抵抗力特点 对寒冷、光、热力，干燥等十分敏感。室温3h，60 ℃ 5min死亡。 采集标本：注意保温迅速送检。 对磺胺类、青霉素、链霉素均敏感。 12、对脑膜炎奈瑟氏菌的标本采送，哪一种是错误的？ A、 低温　 B、 保温　 C、 防干燥　 D、 快速 （二）、致病性与免疫性 1．致病物质 2．所致疾病 3. 免疫性 3. 免疫性：病原可产生群特异性抗体，但不持久。 (三) 微生物学检验 1．标本采集 菌血症期病人采集血