兽医微生物学变态反应参考.ppt

1999\12\28 计算机应用技术学习内容提要 计算机应用技术学习内容提要 天津市教委（试行） 兽医微生物学 (多媒体教学课件) 天津农学院动科系动物预防医学教研室制作 2003/02/28 2.间接凝集试验 将可溶性抗原(或抗体) 吸附不溶性颗粒载体的表面，与相应抗体(或抗原)作用，在电解质存在条件下，出现的特异性的凝集反应称为间接凝集反应。 优点 敏感性高，比直接凝集反应敏感2-8倍。 常用载体 红细胞(绵羊红细胞)、胶乳颗粒等。当载体吸附了可溶性抗原后即称为致敏颗粒。 间接血凝试验 是将可溶性抗原致敏于红细胞表面，用以检测相应抗体。 反向间接血凝试验 如将抗体致敏于红细胞表面，用以检测检样中相应抗原 。 第13章 3.乳胶凝集试验(LAT) 用它胶乳微球（直径约0.8um）作载体吸附某些抗原(或抗体)，可用以检测相应的抗体(或抗原)。 优点 快速简便、易保存、较准确等。 4.协同凝集试验(COAG) 葡萄球菌A蛋白(SPA) 能与多种动物IgG分子的Fc片结合，结合后保持其抗体活性，当与相应的抗原结合时，就可产生凝集反应。本法广泛应用于多种细菌和某些病毒的快速诊断。 第13章 二、沉淀试验 可溶性抗原与相应抗体结合，在电解质存在下，形成肉眼可见的白色沉淀，称为沉淀试验。 参与沉淀试验的抗原称沉淀原，抗体称为沉淀素。抗原可以是多糖、蛋白质、类脂等，抗原分子较小，如细菌的外毒素、内毒素、菌体裂解液，病毒的可溶性抗原、血清、组织浸出液等。 1.环状沉淀试验 在小口径试管内先加入已知抗血清，然后小心沿管壁加入待检抗原于血清表面，使之成为分界清晰的两层。数分钟后，两层液面交界处出现白色环状沉淀，即为阳性反应。 第13章 用途 用于抗原的定性试验，如诊断炭疽的Ascoli试验、链球菌血清型鉴定、沉淀素的效价滴定等。试验时出现白色沉淀带的最高血清稀释倍数，即为血清的沉淀价。 第13章 2.琼脂（免疫）扩散试验 琼脂凝胶呈多孔结构，孔内充满水分，1％琼脂凝胶的孔径约为85nm，各种抗原抗体在琼脂凝胶中自由扩散。抗原抗体在琼脂凝胶中扩散，当二者在比例适当处相遇，即发生沉淀反应，形成肉眼可见的沉淀带，称为琼脂免疫扩散，又简称琼脂扩散和免疫扩散。双向双扩散最常用。 双向双扩散 双向双扩散试验，简称双扩散。即用1％琼脂浇成厚2-3mm的凝胶板，在其上打圆孔，于相邻孔内滴加抗原和抗体，在饱和湿度下，扩散24h或数日，观察沉淀带。 第13章 第13章 抗原抗体在琼脂凝胶内相向扩散，在两孔之间比例最合适的位置上出现沉淀带。 双向扩散主要用于抗原和抗体的测定。用8% Nacl溶液制1%琼脂糖平板，打孔（7孔梅花形、孔径6 mm周边与中心孔距3 mm）。 1.双扩散用于疾病诊断： 以IBD诊断为例，中心孔加IBD标准阳性血清，周围孔分别加IBD标准抗原、生理盐水、待检抗原1.2.3.4。 2.双扩散用于抗体检测： 以免疫鸡IBD抗体检测为例，中心孔加IBD标准抗原，周围孔分别加IBD标准阳性血清.、 IBD阴性血清、待检血清1.2.3.4。 第13章 第13章 3.对流免疫电泳 原理 抗原在碱性溶液(pH8．2)中带负电荷，在电场中向正极移动，而抗体球蛋白带电荷弱，在琼脂电泳时，由于电渗作用，向相反的负极泳动。将抗体置正极端，抗原置负极端，电泳时抗原抗体相向泳动，在两孔之间形成沉淀带。 琼脂凝胶制备 选用优质琼脂（或琼脂糖），浓度为1％-2％，pH通常用pH8.2-8.6的巴比妥缓冲液，离子强度为0.025-0.075mol／L，并加0.01％硫柳汞作防腐剂。 兽医微生物学教学课件 绪言 共六部分，介绍微生物与微生物学的概念，微生物学发展简史，微生物学理论与技术成就及应用，兽医微生物学的地位、任务与贡献。 细菌总论 共七章，介绍细菌的形态、构造、生理，消毒与灭菌，细菌生态、致病机理、遗传变异，细菌分类与命名等。 免疫基础 共七章，介绍抗原抗体，免疫系统，抗感染免疫，变态反应，免疫调节，免疫技术及应用等。 细菌各论 共十二章，介绍各属重要病原细菌的形态、生化特性、致病性、微生物学诊断和免疫防治等。 真菌 共二章，介绍真菌的分类、形态、生化及致病特性，真菌病的诊断与防治等。 病毒 共十四章，介绍病毒的形态、构造、繁殖、遗传、培养，病毒的致病性。各科属重要病毒形态、生化及致病特性，微生物学诊断和防治等。 实验 共十多个，显微镜油镜的使用，细菌形态及构造观察，细菌抹片制备及染色，培养基的制备，细菌的分离培养、生长表现观察、生化试验、药敏试验，沉淀反应和凝集反应，重要病原菌的认识，真菌与病毒培养测定等。 内容简