基质金属蛋白酶MMP-2 及MMP-9在胰腺癌中的表达研究.ppt

基质金属蛋白酶（MMPs)及其组织抑制物（TIMPs）概括与研究现状;据临床统计,约有80 %以上的肿瘤患者死于肿瘤的侵袭与转移,肿瘤细胞侵袭与转移的成功在很大程度上正是依赖于各种酶降解了细胞外基质及基底膜（Extracellular matrix ECM） 依据酶底物成分的理化、生物学特点将这些酶其分为：金属蛋白酶类、丝氨酸蛋白类、巯基蛋白酶类、酸性蛋白酶类等。 ;目前，金属蛋白酶类(matrix metalloproteinases ,MMPs)被认为是这些酶中最重要的一种。 对金属蛋白酶类(MMPs) 及其组织抑制因子( Tissue inhibitors of metalloproteinases , TIMPs) 的研究最多[ 1 ] 。 ;; MMPs nomenclature class; History and Domain Structure of MMPs. Compilation of MMPs. Date of discovery of MMP and amino acid sequence listed in parentheses [4]; MMPs的结构具有高度的同源性,其肽链含有2个Zn离子，其暴露为MMPs 活化所必需;均含有一个半胱氨酸开关,可封闭或暴露活性中心2价阳离子并维持酶蛋白的稳定; 肽链一般含三个结构域即N-末端前肽域、催化域和C-末端类血红素域,后两个域区较为保守。;明胶酶（Gelatinases)即IV型胶原酶(type IVcollagenase)，包括MMP一2（GelatinasesA），MMP一9 （GelatinasesB） Ⅳ型胶原酶可以特异性的降解细胞外基质中的Ⅳ型胶原成分，与肿瘤的侵袭和转移关系密切，是目前MMPs家族中研究的最广泛的一种。 二者的区别在于前者非糖化，分子量为72kD;另外一种被糖化，分子量为92kD。;;MMPs在正常的细胞(结缔组织细胞、内皮细胞、巨噬细胞、淋巴细胞、胸腺细胞等) 和多种肿瘤细胞中均有表达。 MMPs主要功能包括生理功能及病理作用 MMPs 的生理功能主要有:降解细胞外基质膜有效成分、调节细胞粘着直接或间接参与胚胎发育、组织模型再塑及创伤修复等正常生理过程。 MMPs的病理作用主要表现慢性疾病（慢性心脏衰竭 慢性柱塞性肺疾病、慢性炎症）、关节炎以及肿瘤发生、侵润及转移中。; Tissue inhibitors of MMPs (TIMPs);自1983 年Welgus 首次报道TIMP 以来,迄今已发现四种: TIMP-1 , TIMP-2 , TIMP-3 , TIMP-4 。 TIPMPs 广泛分布于组织及体液中,主要由巨噬细胞和结缔组织产生 关于TIMPs对MMPs抑制机制目前尚不完全清楚[6] TIMP-2 还在细胞生长、繁殖及刺激血管生成等生理和病理学方面发挥一定的作用。; ;MMPs与TIMPs在肿瘤侵袭中的研究;MMPs作用机理： （1）破坏局部组织结构，促进肿瘤生长。 （2）破坏基底膜屏障，利于肿瘤转移。 （3）通过对ECM的改进，促进肿瘤新血管的形成。 目前国内对MMPs在乳腺癌、胆管癌、胃癌、结肠癌、前列腺癌、肺癌等癌症中的表达及其与恶性程度、密切相关作用、预后的关系均有所研究，但缺乏统一标准。 MMPs与胰腺癌的关系国内研究较少，尚无较多报道。;　MMPs 和TIMPs 的研究手段;免疫组化法研究MMP--2及MMP--9在脑星型胶质细胞中的表达;半定量逆转录-聚合酶链反应（PT-PCR）方法检验MMP-2及MMP-9在结肠癌组织中的表达。[8];小结;;基质金属蛋白酶MMP-2 及MMP-9在胰腺癌中的表达研究;一、立论依据 ;基质金属蛋白酶 (matrix metalloproteinases,MMPs) 　　基质金属蛋白酶是一个需要Zn++等金属离子作为辅助因子的大家族。各种MMP间具有一定的底物特异性。同一种MMP可降解多种细胞外基质及基底膜（ECM），一种细胞外基质成分又可被多种MMP降解，但不同酶的降解效率不同。 　　MMPs几乎能降解ECM中的各种蛋白成分,肿瘤细胞破坏细胞组织学屏障在肿瘤侵袭转移中起关键性作用，MMPs被认为是该过程中最重要的蛋白水解酶，从而成为近年来研究的热点。;目??MMPs家族已分离鉴别出28个成员，编号分别为MMP1～28。接基底物特异性主要分为六类： (1)胶原酶(collagenase)包括MMP-1，8，13。 (2)IV型胶原酶(type IVcollagenase)，即明胶酶，包括MMP一2，MMP一9 。 (3)基质溶解素(matrilysin)，包括MMP一7．26。 (4)膜型基质金属蛋白酶(MT—MMp)，包括MMP-l4