新课标高考生物总复习：选修1第1部分 实验2 分离以尿素为氮源的微生物.ppt

* 　1.(2008·广东理综38)苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如图所示，①为土壤样品，请回答下列问题： (1)②中培养目的菌株的选择培养基中应加入　_____　作为碳源，②中不同浓度碳源的培养基　____　(A.影响；B.不影响)细菌的数量，如果要测定②中活细菌数量，常采用_______________　法。 (2)④为对照、微生物在④中不生长、在⑤中生长，④与⑤培养基的主要区别在于　______________________________；使用　___________________法可以在⑥上获得单菌落。采用固体平板培养细菌时为什么进行倒置培养？　_______________________________________ (3)如何比较不同菌株降解苯酚能力的大小？ _________________________________。 (4)实验过程中如何防止其他微生物的污染？_________________________________。 【答案】 (1)苯酚 A 　 稀释涂布平板 (2) ④的培养基没有加入苯酚作为碳源，⑤培养基的中加入苯酚作为碳源　 稀释涂布平板法或平板划线 防止冷凝后形成的水珠滴落在培养基上污染培养基 (3)　取5只洁净培养瓶→分别加入相同培养基(加等量的苯酚，用pH试纸检测这5只瓶内培养基的pH，用苯酚调节使之相等，苯酚是唯一的碳源)→分别接种5种等量的来自不同菌株的菌种→在相同的适宜条件下培养相同时间→再用pH试纸检测这5只瓶内培养基的pH　。　 (4)从制备培养基到接种与培养等全部实验过程要无菌操作。(1)各种器皿必须是无菌的。(2)各种培养基必须是无菌的：一般加入培养基的三角瓶、试管，也是在1 kg/cm2压力121 ℃灭菌15～30 min。(3)菌转移过程要避免杂菌污染和菌外泄：转接过程中，瓶塞和封口膜只能夹持手上，不能落台面；操作过程在酒精灯火焰旁操作；接种环接种前，环头烧红，环柄火焰上穿梭1～2次，放入试管和培养皿中稍冷却后接触菌落或菌液，使用完毕后，重复使用前操作，避免菌外泄；使用玻璃刮刀和镊子时，从酒精中取出后燃尽其上酒精即可　。 答案 【解析】无菌操作技术、菌种的分离和菌种密度的测定这些技术都是该题考查的目标。该题还要求学生运用微生物培养的技术来解决“比较不同菌株降解苯酚能力大小”的问题。 2.(2010·全国卷Ⅰ34)下列是与微生物培养有关的问题，请回答： (1)某细菌固体培养基的组成成分是KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4、葡萄糖、尿素、琼脂和蒸馏水，其中凝固剂是　______，碳源是______　，氮源是　_______　。已知只有能合成脲酶的细菌才能在该培养基上生长，故该培养基属于　______　培养基。按照化学成分分类，该培养基属于　____　培养基。从同化作用类型看，用该培养基培养的细菌属于______　。 (2)将少量细菌接种到一定体积的液体培养基中，适宜条件下培养，定时取样测定菌体数目，以时间为横坐标，以菌体数目的对数为纵坐标，可以得到细菌的　_______曲线。该曲线中以菌体数目的对数作为纵坐标的原因是　____________________________　。实验室中，为了获得形态和生理特征一致的菌体，一般应在　____　期取材；在生产中，常收集培养至　_______　期的细菌用于次生代谢产物的提取。 【答案】 (1)琼脂 葡萄糖　 尿素 选择 合成 异养型 (2)生长　培养液中的细菌以指数形式增长，取对数便于反映细菌群体的生长规律 对数 稳定 【解析】本题主要考查学生的理解能力，考查微生物的培养。第(1)小题，该培养基中，琼脂为凝固剂，葡萄糖为碳源，尿素为氮源；由于只有能合成脲酶的细菌才能在该培养基上生长，可以用来选择出能够合成脲酶的细菌，在功能上称为选择培养基；由于其化学成分明确，故又称为合成培养基；由于该培养基中存在着有机碳源葡萄糖，故可推测从同化作用类型上看，用该培养基培养的细菌属于异养型。 第(2)小题，在一定体积的液体培养基中培养微生物，定期取样，然后以时间为横坐标，以细菌数目的对数为纵坐标，所得的曲线称为微生物的群体生长曲线，以菌体数目的对数作为纵坐标的原因是菌体数目往往非常大，且变化率也很高，直接以菌体数目为纵坐标不利于作图。实验室中，为了获得形态和生理特征一致的菌体，一般应在对数期取材；在