毒理chapter6-1.1(5版).ppt

第六章 外源化学物的一般毒性作用 掌握： 基本概念、试验目的、急性毒性试验设计、LD50的计算方法及急性毒性分级； 熟悉： 急性毒性替代试验的方法、局部刺激试验的方法、蓄积毒性、亚慢性毒性、慢性毒性试验设计； 了解: 化学毒物所致的病理学改变及其评价。 一般毒性作用： 也称为基础毒性，是全身各系统对外源化学物的毒作用反应。 特殊毒性作用 Section 1 急性毒性作用 （acute toxicity） 健康相关产品毒理学评价阶段与试验项目 acute toxicity:是指机体（实验动物或人）一次或24小时内接触多次一定剂量外源化学物后在短期内所产生的毒作用及死亡。 概念的解释： 经口、注射器染毒，瞬间给予； 经呼吸道、皮肤染毒，一段时间。 24小时内多次接触：外源化学物毒性很低。 短期内：最长的观察期限为14天。 获得急性毒性参数：LD50、LD100、LD0等； 初步评价毒物对机体的毒效应特征、靶器官、剂量-反应（效应）关系和对人体产生损害的危险性； 为重复剂量、亚慢性和慢性毒性试验等后续试验提供接触剂量设计依据，并为观察指标的选择提出建议； 为毒理学机制研究提供初步的线索。 经典急性毒性试验设计： 急性毒性替代试验： LD50应用中的有关问题： 急性毒性分级和评价： （一）经典急性毒性试验的设计 选择的原则： 选择对化学毒物的代谢和毒效应表现与人的反应尽可能一致的实验动物； 品系纯化； 价格较低和易于饲养和获得。 实验动物的选择 实验动物的种属和品系； 实验动物的年龄和体重； 实验动物的性别； 动物数量； 实验动物的预检； 禁食。 实验动物的选择 1.实验动物的种属和品系： 种属： 最好用两种种属的动物 啮齿类:小鼠、大鼠、豚鼠或家兔； 非啮齿类：狗或猴。 大鼠为首选的啮齿类动物。 实验动物的选择 品系：起源于共同祖先的一群动物。 依据遗传学背景分类： 近交系 （Inbred strain） 杂交群 （Hybrid strain） 封闭群（Closed colony），如：昆明种小鼠、Wistar大鼠、SD大鼠等。 实验动物的选择 实验动物的选择 3.实验动物的性别： 雌雄各半； 化学毒物对雌、雄动物的毒效应有明显差异时； 致畸试验，可仅作雌性动物的LD50测试； 实验动物必须是未曾交配和受孕的动物。 实验动物的选择 4.动物数量与分组 大、小鼠等小动物---每组10只 狗等大动物---每组6只 几组？ 实验动物的选择 动物分组： 改进寇氏法至少设5个剂量组； 概率单位图解法一般设6~10组； 霍恩法设4个剂量组； 分组方法： 随机分组。 实验动物的选择 5.实验动物的预检： 通常情况下观察5~7天，剔除异常的动物，选择健康动物； 检疫期与实验期雌雄动物分笼饲养，防止交配及受孕。 实验动物的选择 6.禁食： 大鼠应隔夜禁食； 小鼠应禁食4h； 大动物可在染毒前不喂食，染毒后继续禁食3~4h； 要保障饮水的供应。 选择的原则： 模拟人在生活和生产环境中实际接触受试物的途径和方式； 有利于不同化学物之间急性毒性大小的比较； 受试物的性质和用途； 各种受试物毒性评价程序的要求等。 染毒途径的选择 最常用的染毒途径为： 经口； 经呼吸道； 经皮肤； 注射途径。 染毒途径的选择 经口染毒：灌胃、喂饲、吞咽胶囊； 经呼吸道：吸入染毒、气管内注入； 经皮肤染毒：动物背部皮肤、小鼠浸尾法； 注射途径:腹腔注射、静脉注射、肌内注射、皮下注射。 染毒途径的选择 各种染毒途径都有一个最大染毒容量的问题： 小鼠一次灌胃体积0.2?1.0ml/只； 大鼠一次灌胃体积1.0?4.0ml/只； 豚鼠一次灌胃体积1.0~5.0ml/只； 1.查阅文献 有相关毒性资料可供参考者； 没有相关毒性资料可供参考者 （1）有相关毒性资料可供参考者 找出与受试化学毒物结构与理化性质近似的化学物的毒性资料 ，以文献资料中相同的动物种系和相同接触途径所测得的LD50值作为受试化学物的预期毒性中值。 设定以此预期值作为待测化学物的中间剂量组，并在该剂量的上下各设计1~2个剂量作为预试验剂量。 （2）无相关毒性资料可供参考者 以最大耐受量作为实验的最高剂量 ； 以1mg/kg为最低剂量组 ，组距为4，进行预实验。 2.预试验 找出10%~90%或0%~100%致死剂量的范围，然后在这个剂量范围内以合适的间距设几个剂量组，作为正式试验的剂量。 3.正式试验 组数的确定： LD50的计算方法： 改进寇氏法（karber’s method） 序贯法（sequential method） Bliss法 霍恩法（Horn） 改进寇氏法至少设5个剂量组；