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生化教研室;1. 掌握分离纯化蛋白质的基本原理和基本过程
2. 熟悉盐析、离心、层析等生化基本技术在蛋白质分离纯化中的综合应用;硫酸铵盐析初步分离 γ-球蛋白;盐析原理;分段盐析; 50％饱和的硫酸铵能使血清中的球蛋白沉淀，而33％饱和的硫酸铵则使γ-球蛋白沉淀。;实验试剂及器材;;凝胶层析的定义; 葡 聚 糖 凝 胶 颗 粒;凝胶层析的原理;实验器材及试剂;平衡 ; ;②加热法
在沸水浴中将湿凝胶浆逐渐升温至近沸，1-2小时即可达到凝胶的充分胀溶。加热法既可节省时间又可消毒。
;2.装柱; （2）装柱：把溶胀好的糊状凝胶边搅拌边倒入柱中，同时开启止水螺丝，控制一定的流速，使柱中的凝胶一直处在溶液中。最好一次连续装完，待凝胶装至10-15cm即可。注意防止气泡与分层,可用玻棒搅拌使 表面平整。;3.平衡; 将柱中多余的液体从底部流出后关闭止水螺丝，取前面制备好的γ-球蛋白样品小心加到凝胶柱上，打开止水螺丝，使样品溶液流入柱内，当样品流至略高于柱床表面时，关闭止水螺丝。;
用缓冲液进行洗脱，控制缓冲液在约每5秒一滴的流速。; 收集洗脱液，每管收集12d，共收集12管，同时对收集液体进行检测。;蛋白质检测;
从收集到的试管中取收集液1滴于比色板中，加入奈氏试剂1滴，观察并记录实验现象。
;实验结果; 用洗脱液加满柱子，加快流速，清洗层析柱。
清洗完毕后，保持胶面上方有4-5cm高度缓冲液，关闭止水螺丝。
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